Ero kilpailukykyisen ja kilpailemattoman ELISA n välillä
Share
avainero kilpailevan ja kilpailukyvyttömän ELISA: n välillä on se kilpaileva ELISA käyttää inhibitioantigeeniä, kun taas kilpaileva ELISA ei käytä inhibitioantigeeniä määritykseen.
Entsyymisidottu immunosorbenttimääritys (ELISA) on immunologinen määritys, joka havaitsee erilaisia kohteita, kuten vasta-aineita, antigeenejä, proteiineja ja glykoproteiineja. Se on nopea ja yksinkertainen menetelmä suorittaa. Siksi sitä käytetään useammin tutkimus- ja diagnostisiin tarkoituksiin. ELISA sisältää entsyymien käytön sekä vasta-aineen ja antigeenin spesifisen sitoutumisen. Reaktioiden tapahtumisen perusteella ELISA-tyyppejä on neljä: suora ELISA, epäsuora ELISA, kerros ELISA ja inhibitio ELISA. Suora, epäsuora ja kerros ELISA ovat kilpailukykyttömän ELISA-tyyppejä, kun taas inhibitio-ELISA on eräänlainen komplektiivinen ELISA. Tämän artikkelin päätarkoituksena on pohtia eroa kilpailevan ja kilpailemattoman ELISA: n välillä.
SISÄLLYS
1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mikä on kilpaileva ELISA
3. Mikä on kilpailematon ELISA
4. Kilpailevan ja kilpailemattoman ELISA: n väliset yhtäläisyydet
5. Vertailu rinnakkain - Kilpaileva vs. kilpailematon ELISA-taulukko
6. Yhteenveto
Mikä on kilpailullinen ELISA??
Kilpaileva ELISA mittaa näytteen antigeenipitoisuuden havaitsemalla signaalihäiriöt. Tässä määrityksessä käytetään inhibiittoriantigeeniä. Siksi se on eräänlainen inhibitio ELISA. Tämän menettelyn aikana näytteessä olevat antigeenit kilpailevat valitun vertailuantigeenin kanssa sitoutumisesta tiettyyn määrään leimattua vasta-ainetta. Lisäksi tämä menetelmä alkaa näytteen inkuboinnista leimatun vasta-aineen ylimäärän kanssa. Vertailun antigeeni tulisi myös esipäällystää monikuoppaisella määrityslevyllä. Sitten näyteseos tulisi lisätä määrityslevylle, joka sisältää vertailuantigeenin. Vapaat vasta-aineet sitoutuvat vertailuantigeeniin näytteen antigeenimäärän mukaan. Siksi, jos läsnä on enemmän näyteantigeeniä, vähemmän referenssiantigeeniä havaitaan. Siten se luo heikomman signaalin.
Kuvio 01: ELISA
Sitä vastoin, kun näyte sisältää vähemmän määrää antigeeniä, yhä useampi vertailiantigeeni vie vasta-aineita ja antaa voimakkaan signaalin. Koska kilpaileva ELISA antaa voimakkaamman signaalin, kun näyte sisältää pienen määrän antigeenejä, kilpaileva ELISA on erittäin herkkä määritys, jopa näytteille, joissa on pieni määrä antigeenejä.
Joissakin kilpailevissa ELISA-pakkauksissa käytetään leimattua antigeeniä leimatun vasta-aineen sijasta. Tässä leimattu antigeeni ja näyteantigeeni kilpailevat sitoutumisesta primaariseen vasta-aineeseen. Samoin kun näytteessä olevan antigeenin määrä on pieni, vasta-aineisiin sitoutuvan leimatun antigeenin määrä on suurempi ja luo voimakkaamman signaalin.
Mikä on kilpailematon ELISA?
Neljästä ELISA-tyypistä kolme tyyppiä ei ole kilpailukykyisiä. Ne ovat suoraa ELISAa, epäsuoraa ELISAa ja voileipä ELISAa. Kaikki kolme muotoa toimivat yhteisen ELISA-periaatteen mukaisesti, ja niiden metodologioissa on pieniä eroja.
Suora ELISA käyttää entsyymileimattua primaarista vasta-ainetta. Siksi se ei vaadi sekundaarista vasta-ainetta. Siksi suora ELISA on nopeampi kuin muun tyyppinen ELISA. Primaarinen vasta-aine sitoutuu suoraan levyssä läsnä olevaan immobilisoituun kohdeantigeeniin. Siksi entsyymi-substraattireaktio tapahtuu tuottaen näkyvän signaalin.
Kuvio 02: Voileipä ELISA
Toisin kuin suora ELISA, epäsuora ELISA käyttää leimaamatonta primaarista vasta-ainetta ja entsyymileimattua sekundaarista vasta-ainetta. Kun primaarinen vasta-aine sitoutuu immobilisoituun antigeeniin, sekundaarinen vasta-aine sitoutuu primaariseen vasta-aineeseen. Toissijaisessa vasta-aineessa oleva entsyymi reagoi antigeenin kanssa ja tuottaa näkyvän signaalin. Sandwich-ELISA eroaa sekä suorasta että epäsuorasta ELISA: sta. Tässä vasta-aine immobilisoidaan määrityslevyn seinämään.
Mitkä ovat kilpailukykyisen ja kilpailemattoman ELISA: n väliset yhtäläisyydet??
- Kilpaileva ja kilpailematon ELISA ovat kahta tyyppiä immunosorboivia määritystekniikoita.
- Ne ovat erittäin joustavia ja herkkiä tekniikoita.
- Lisäksi sekä kilpaileva että kilpailematon ELISA ovat entsyymisidottuja immunomäärityksiä.
- Lisäksi molemmat menetelmät tuottavat signaalin entsyymi-substraatti-reaktion vuoksi.
Mikä on ero kilpailukykyisen ja kilpailemattoman ELISA: n välillä??
Kilpaileva ELISA on erään tyyppinen ELISA, joka perustuu analyytin antigeenin ja leimatun antigeenin loppuunsaattamiseen rajoitetulle määrälle spesifistä vasta-ainetta. Toisaalta ei ole olemassa tällaista kilpailua kiinnostuksen kohteena olevan antigeenin ja vertailuantigeenin välillä ei-kilpailukykyisessä ELISA: ssa. Siksi tämä on avainero kilpailukykyisen ja kilpailukyvyttömän ELISA: n välillä. Samoin kilpaileva ELISA on inhibitio-ELISA, kun taas ei-kilpailukykyinen ELISA ei ole inhibitio-ELISA. Joten tämä on myös ero kilpailukykyisen ja kilpailemattoman ELISA: n välillä.
Lisäksi kilpaileva ELISA on sopivampi pienen määrän kiinnostavan antigeenin mittaamiseen. Se on herkkä menetelmä. Toisaalta ei-kilpailukykyinen ELISA ei riipu näytteessä olevien antigeenien lukumäärästä. Siksi tämä on myös ero kilpailukykyisen ja kilpailemattoman ELISA: n välillä.
Infografian alla selitetään ero kilpailukykyisen ja kilpailemattoman ELISA: n välillä.
Yhteenveto - Kilpailu- tai kilpailukykyinen ELISA
Kilpailukykyinen ja ei-kilpailukykyinen ELISA ovat kaksi päätyyppiä ELISA- tai entsyymisidonnaisiin immunosorbenttimäärityksiin. Tiivistettäessä eroa kilpailevan ja ei-kilpailukykyisen ELISA: n välillä, kilpaileva ELISA perustuu kilpailuun mielenkiinnon kohteena olevan antigeenin ja vertailuantigeenin välillä rajoitettuun määrään vasta-aineita kohtaan. Siksi kilpailevaa ELISAa kutsutaan myös esto-ELISA: ksi. Toisaalta ei-kilpailukykyinen ELISA ei ole riippuvainen kilpailusta kohdeantigeenien ja vertailuantigeenien välillä. Se käyttää ylimäärää leimattua spesifistä vasta-ainetta mielenkiinnon kohteena olevaan analyytiin. Siksi tämä on avainero kilpailukykyisen ja kilpailukyvyttömän ELISA: n välillä. Suora ELISA, epäsuora ELISA ja kerros ELISA ovat kilpailuttelemattoman ELISA: n kolme päätyyppiä.
Viite:
1. Bio-Rad. "ELISA-tyypit | Bio-Rad.” Bio, saatavana täältä.
2. ”Neljä ELISA-tyyppiä.” Cusabio Life Science - Biologian tiedekumppanisi, saatavana täältä.
Kuvan kohteliaisuus:
“Elisa tipus” kirjoittanut Carolfv333 - Oma työ (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia.
“Sandwich Immunoassay, ELISA” - kirjoittanut NickCT - Oma työ (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta
