Ero immunofluoresenssin ja immunohistokemian välillä

Avainero - immunofluoresenssi vs. immunohistokemia
 

Sairausdiagnostiikasta, jossa käytetään molekyylibiologisia menetelmiä, on tullut nouseva alue kliinisessä laboratoriotekniikassa. Se sisältää kaikki testit ja menetelmät sairauden tunnistamiseksi ja sairauden syyn ymmärtämiseksi analysoimalla DNA: ta, RNA: ta tai ekspressoituja proteiineja organismissa. Molekyylidiagnostiikan nopea kehitys on mahdollistanut tartuntatautien ja muiden tartuntatautien perustutkimuksen. Niitä käytetään määrittämään muutokset sekvenssissä tai ilmentymistasoissa kriittisissä tauteihin osallistuvissa geeneissä tai proteiineissa. Immunofluoresenssi (IF) ja immunohistokemia (IHC) ovat kaksi tällaista laajalti käytettyä tekniikkaa syöpäbiologiassa. IF on IHC-tyyppi, jossa fluoresenssin havaitsemismenetelmää käytetään monoklonaalisten ja polyklonaalisten vasta-aineiden analysointiin, kun taas IHC käyttää kemiallisia menetelmiä monoklonaalisten ja polyklonaalisten vasta-aineiden havaitsemiseksi. Tämä on avainero IF: n ja IHC: n välillä.

SISÄLLYS

1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mikä on immunofluoresenssi 
3. Mikä on immunohistokemia
4. Immunofluoresenssin ja immunohistokemian väliset yhtäläisyydet
5. Vertailu rinnakkain - immunofluoresenssi vs. immunohistokemia taulukkomuodossa
6. Yhteenveto

Mikä on immunofluoresenssi (IF)?

Immunofluoresenssi on havaitsemistekniikka, jossa määrityksessä käytetyt vasta-aineet leimataan käyttämällä fluoresoivia väriaineita tai fluoresoivia proteiineja havaitsemista varten. Leimatut sekundääriset vasta-aineet voivat johtaa ei-toivottuihin taustasignaaleihin; siksi IF-tekniikka perustuu itse primäärivasta-aineen leimaamiseen tällä hetkellä, jotta vältetään epätoivotut signaalit havaitsemisen aikana. Tämän tekniikan avulla estetään epäspesifinen sitoutuminen primaarisen ja sekundaarisen vasta-aineen välillä, ja se on nopeampaa, koska siihen ei ole sekundaarista inkubointivaihetta. Myös tiedon laatu paranee.

Kuvio 01: Tupla-immunofluoresenssivärjäys BrdU: lle, NeuN: lle ja GFAP: lle

Fluorikromit tai fluoresoivat väriaineet ovat yhdisteitä, jotka voivat absorboida säteilyä, edullisesti ultraviolettiä säteilyä, joka herättää. Kun hiukkaset saavuttavat perustilaan viritetystä tilasta, ne lähettävät säteilyä, joka vangitaan ja havaitaan ilmaisimella spektrin muodostamiseksi. On erittäin tärkeää, että fluoresoiva leima on yhteensopiva ja stabiili tietylle reaktiolle ja se tulisi konjugoida kunnolla vasta-aineeseen tarkkojen tulosten saamiseksi. Yksi käytetyimmistä fluorokromeista on fluoreseiini-isotiosyanaatti (FITC), joka on vihreää, absorptio- ja emissiohuipun aallonpituuksilla 490 nm ja vastaavasti 520 nm. Rodamiini, toinen IF: ssä käytetty aine, on väriltään punainen ja sillä on selvät absorptio- ja emissiohuipun aallonpituudet 553 nm ja 627 nm..

Mikä on immunohistokemia (IHC)?

IHC on molekyylin testausmenetelmä, jonka avulla tunnistetaan ja varmistetaan antigeenin läsnäolo kohdesolussa. Kohdesolu voi olla tarttuva hiukkas, mikrobipatogeeni tai pahanlaatuinen kasvainsolu. IHC käyttää monoklonaalisia ja polyklonaalisia vasta-aineita määrittämään antigeenien läsnäolo kohdesolujen solupinnalla. Tekniikka perustuu antigeeni-vasta-aineiden sitoutumiseen. Näihin vasta-aineisiin konjugoidaan detektiomarkkeri tietyn antigeenin läsnäolon tai puuttumisen havaitsemiseksi. Nämä markkerit voivat olla kemiallisia markkereita, kuten entsyymejä, fluoresoivasti leimattuja vasta-aineita tai radioleimattuja vasta-aineita.

Kuvio 02: Immunohistokemian värjäys hiiri-aivo-siivu

IHC: n suosituin sovellus on syöpäsolubiologiassa pahanlaatuisten kasvainten esiintymisen tunnistamiseksi, mutta sitä käytetään myös tartuntatautien havaitsemiseen.

Mitkä ovat samanlaisuudet immunofluoresenssin ja immunohistokemian välillä?

• Immunofluoresenssi ja immunohistokemia tapahtuvat in vitro -olosuhteissa.
• Molemmat tekniikat perustuvat antigeeni-vasta-aineeseen
• Molemmat ovat erittäin nopeita tekniikoita.
• Tekniikoiden tulokset ovat toistettavissa.
• Molemmilla on parantunut tiedonlaatu.
• Näitä tekniikoita käytetään syövän ja tartuntatautien diagnostiikassa.

Mikä on ero immunofluoresenssin ja immunohistokemian välillä?

Immunofluoresenssi vs. immunohistokemia
IF on havaitsemistekniikka, jossa määrityksessä käytetyt vasta-aineet leimataan käyttämällä fluoresoivia väriaineita tai fluoresoivia proteiineja havaitsemiseen.	IHC on havaitsemistekniikka, jossa määrityksessä käytetyt vasta-aineet leimataan käyttämällä detektiota varten kemikaaleja tai radioaktiivisia elementtejä.
tarkkuus
Tarkkuus on suurempi IF-tekniikassa verrattuna IHC: hen.	Tarkkuus on alhaisempi IHC: ssä.
spesifisyys
IF on tarkempi.	IHC on vähemmän tarkka.

Yhteenveto - immunofluoresenssi vs. immunohistokemia

Molekyylimekanismit ovat tuoneet aikaan monia muutoksia lääketieteen alalla, ja ne ovat johtaneet edistyneisiin molekyylitestausmenetelmiin, jotka ovat aiheuttaneet käännöksiä diagnostiikan alalla. Nämä keksinnöt ovat johtaneet sairauden nopeaan ja tarkkaan tunnistamiseen ja vahvistamiseen, mahdollistaen siten lääkkeiden onnistuneen antamisen ja tuotannon. Näitä tekniikoita käytetään myös farmakologiassa lääkkeiden kohteiden löytämiseksi ja lääkkeen farmakokineettisten ominaisuuksien vahvistamiseksi lääkeaineenvaihdunnan aikana. IF ja IHC ovat kaksi diagnoosimenetelmää, jotka perustuvat antigeenin ja vasta-aineiden sitoutumisen käsitteeseen, vaikka havaitsemistapa molemmissa tekniikoissa eroaa. IF käyttää fluoresenssin periaatetta antigeenin havaitsemiseksi ja IHC käyttää kemiallisen konjugaation käsitettä antigeenin havaitsemiseksi. Tämä on ero IF: n ja IHC: n välillä.

Lataa PDF-versio immunofluoresenssista vs. immunohistokemia

Voit ladata tämän artikkelin PDF-version ja käyttää sitä offline-tarkoituksiin lainaushuomautuksen mukaisesti. Lataa PDF-versio tästä. Immunofluoresenssin ja immunohistokemian ero.

Viitteet:

1. Aoki, Valéria, et ai. "Suora ja epäsuora immunofluoresenssi." Anais Brasileiros de Dermatologia, SociedadeBrasileira de Dermatologia, saatavana täältä. Saavutettu 25. elokuuta 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha, et ai. "Immunohistokemian sovellukset." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, elokuu 2012, saatavana täältä. Saavutettu 25. elokuuta 2017.

Kuvan kohteliaisuus:

1. ”Tupla-immunofluoresenssivärjäys BrdU: lle, NeuN: lle ja GFAP: lle”, kirjoittanut Ma M, Ma Y, Yi X, Guo R, Zhu W, Fan X, Xu G, Frey WH 2nd, Liu X. - Transformoivan kasvutekijän intranasaalinen anto- beeta1 hiirissä aivohalvauksen jälkeen vähentää infarktin määrää ja lisää neurogeneesiä subventrikulaarisella vyöhykkeellä; PMID 19077183 (CC BY 2.0) Commons Wikimedian kautta
2. ”ABC-immunohistokemian värjätyn hiiren kudoksen hypotalamus” zabbn - Oma työ (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta