Ero immunosytokemian ja immunohistokemian välillä

Avainero - immunosytokemia vs. immunohistokemia
 

Immunosytokemia (ICC) ja immunohistokemia (IHC) ovat kaksi laajalti käytettyä tekniikkaa molekyylidiagnostiikassa, joka tunnistaa ja vahvistaa sekä ei-tarttuvien tautien että tarttuvien tautien esiintymisen soluissa olevien molekyylimarkkerien perusteella. Keskeinen ero immunosytokemiassa ja immunohistokemiassa on molekyyli, jota käytetään analyysimenetelmänä näissä tekniikoissa. ICC: ssä käytetään primaarisia ja sekundaarisia vasta-aineita, jotka on konjugoitu markkereilla, kuten fluoresenssilla, kun taas IHC, monoklonaalisia ja polyklonaalisia vasta-aineita käytetään diagnostisissa määrityksissä.

SISÄLLYS

1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mikä on immunosytokemia?
3. Mikä on immunohistokemia
4. Immunosytokemian ja immunohistokemian väliset yhtäläisyydet
5. Vertailu rinnakkain - immunosytokemia vs. immunohistokemia taulukkomuodossa
6. Yhteenveto

Mikä on immunosytokemia (ICC)?

ICC käyttää primaarisia ja sekundaarisia vasta-aineita, jotka on sitoutunut markkereihin, kuten fluoresoiviin markkereihin tai entsyymeihin, ja se on tehokas havaintomenetelmä kohdesoluissa olevien antigeenien havaitsemiseksi, jotka voivat olla joko tarttuvia solupartikkeleita tai syöpäkasvainsoluja. Immunosytokemiaan vaaditaan kolmen tyyppisiä kontrolleja.

  • Primääri vasta-aine - kontrolli, joka osoittaa primäärisen vasta-aineen sitoutumisen spesifisyyden antigeeniin
  • Toissijainen vasta-aine - kontrolli, joka osoittaa, että leima on spesifinen primaariselle vasta-aineelle
  • Etiketin hallinta - näytä, että merkinnät ovat seurausta lisätystä etiketistä, eivät endogeenisestä merkinnästä.

Kuvio 01: Immunosytokemia leimaa yksittäisiä proteiineja soluissa (tässä tyrosiinihydroksylaasi sympaattisten autonomisten neuronien aksoneissa on esitetty vihreänä).

Ensisijainen vasta-ainekontrolli on spesifinen jokaiselle uudelle vasta-aineelle, eikä sitä voida toistaa jokaiselle kokeelle. Sekundäärinen vasta-ainekontrolli suunnitellaan kokeessa käytetyn primaarisen vasta-aineen perusteella ja sisältyy jokaiseen kokeeseen. Merkinnän valvonta sisältyy, jos toimenpiteen ehtoa muutetaan, näytettä vaihdetaan tai kun odottamaton merkintä löytyy.

ICC: n kaksi pääsovellusta ovat radioimmunomääritys (RIA) ja entsyymisidonnainen immunosorbenttimääritys (ELISA). Yleisin käytetty vasta-aine on immunoglobuliini G.

Mikä on immunohistokemia (IHC)?

Immunohistokemiassa lähteenäyte sisältää monoklonaalisia ja polyklonaalisia vasta-aineita antigeenien läsnäolon määrittämiseksi vieraissa soluissa. Tämä tekniikka perustuu antigeenin ja vasta-aineen sitoutumisen spesifiseen reaktioon. Tunnistamisessa käytetyt vasta-aineet voidaan leimata erilaisilla markkereilla; ne voivat olla fluoresenssimarkkereita, radioleimattuja markkereita tai kemiallisia markkereita. Helpottamalla in vitro sitoutumisen antigeenin ja kohdennetun vasta-aineen välillä, solun tietyn proteiinin esiintyminen tai puuttuminen voidaan määrittää.

Kuvio 02: Normaalin munuaisen immunohistokemiallinen värjäys CD10: llä

Tällä hetkellä tutkijat osallistuvat kohdevasta-aineiden kehittämiseen soluissa läsnä oleville spesifisille antigeeneille, jotka voivat joko kehittyä pahanlaatuisiksi kasvainsoluiksi tai antigeeneiksi, jotka ovat läsnä tartunta-aineissa, kuten HIV.

Mitkä ovat samankaltaisuudet immunosytokemian ja immunohistokemian välillä?

  • Reaktiot ovat erittäin spesifisiä ja tarkkoja ICC: ssä ja IHC: ssä.
  • ICC: n ja IHC: n sovelluksiin sisältyy syövän ja tartuntatautien diagnosointi.
  • Steriilit olosuhteet tulisi ylläpitää molemmissa olosuhteissa, ja ne tulisi suorittaa in vitro
  • Molemmat tekniikat tarjoavat toistettavia tuloksia.
  • Molemmat ovat nopeita.
  • Radiomerkinnöitä, fluoresenssitekniikoita käytetään detektiomenetelminä sekä ICC: ssä että IHC: ssä.
  • Molemmat perustuvat antigeeni-vasta-ainepariin.

Mikä on ero immunosytokemian ja immunohistokemian välillä?

Immunosytokemia (ICC) vs. immunohistokemia (IHC)

ICC käyttää primaarisia ja sekundaarisia vasta-aineisiin sitoutuneita markkereita, kuten fluoresoivia markkereita tai entsyymejä, ja se on tehokas havaintomenetelmä kohdesoluissa olevien antigeenien havaitsemiseksi.. IHC on menetelmä, joka käyttää monoklonaalisia ja polyklonaalisia vasta-aineita antigeenien, jotka ovat erityisiä proteiinimarkkereita solujen pinnalle, esiintymisen määrittämiseksi.
Näytelähde
Kudoksista peräisin olevia näytteitä, jotka on histologisesti jalostettu ohuiksi leikkeiksi, käytetään ICC: ssä. IHC käyttää näytteitä, jotka koostuvat yksikerroksessa kasvatetuista soluista tai suspensiossa olevista soluista, jotka on talletettu objektilasille.
Näytteen käsittely
ICC: ssä solujen tulisi olla läpäiseviä vasta-aineiden tunkeutumisen helpottamiseksi solunsisäisiin kohteisiin. IHC: ssä solut kiinnitetään formaliiniin, parafiiniin upotettiin ennen värjäämistä.

Yhteenveto - immunosytokemia vs. immunohistokemia

Molekyylidiagnostiikkaa käytetään tunnistamaan ja vahvistamaan sekä tarttuvien tautien että tarttuvien tautien esiintyminen soluissa olevien molekyylimarkkerien perusteella. Molekyylimarkkerit voivat olla proteiineja tai DNA- tai RNA-sekvenssejä; Teknologioiden, kuten ICC: n ja IHC: n, kehittäminen ovat loi tietä tutkijoille tunnistaa taudin ja sen syyn varhaisessa vaiheessa. Sekä ICC että IHC riippuvat spesifisistä reaktioista vasta-aineen ja antigeenin välillä, vaikka näytteen lähde. Tärkein ero immunosytokemian ja immunohistokemian välillä on näiden kahden menetelmän näytteenkäsittely.

Lataa PDF-versio immunosytokemiasta vs. immunohistokemiasta

Voit ladata tämän artikkelin PDF-version ja käyttää sitä offline-tarkoituksiin lainaushuomautuksen mukaisesti. Lataa PDF-versio tästä. Immunosytokemian ja immunohistokemian ero.

Viitteet:

1. Burry, Richard W. “Immunosytokemian valvonta: päivitys”. Histokemian ja sytokemian lehti, SAGE-julkaisut, tammikuu 2011, saatavana täältä. Saavutettu 24. elokuuta 2017.
2. Duraiyan, Jeyapradha, et ai. "Immunohistokemian sovellukset." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, elokuu 2012, saatavana täältä. Saavutettu 24. elokuuta 2017.

Kuvan kohteliaisuus:

1. Swardenin "immunohistokemia" - Oma työ (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta
2. Nephron ”Kidney cd10 ihc” - Oma työ (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta