Ero affiniteetin ja ioninvaihtokromatografian välillä

avainero affiniteetin ja ioninvaihtokromatografian välillä on se voimme käyttää affiniteettikromatografiaa erottamaan ladatut tai lataamattomat komponentit seoksessa, kun taas ioninvaihtokromatografiaa voidaan käyttää erottamaan ladatut komponentit seoksessa.

Kromatografia on tekniikka, jota voimme käyttää erottamaan halutut komponentit seoksessa. On erityyppisiä tyyppejä, kuten nestekromatografia, kaasukromatografia jne. Affiniteettikromatografia ja ioninvaihtokromatografia ovat nestekromatografian kaksi alakategoriaa. Näissä tekniikoissa on myös kaksi vaihetta. Ne ovat nimittäin kiinteää vaihetta ja liikkuvaa vaihetta. Näiden tekniikoiden tarkoituksena on erottaa komponentit liikkuvassa vaiheessa komponenttien sitoutumisesta riippuen liikkumattoman vaiheen pintaan.

SISÄLLYS

1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mikä on affiniteettikromatografia
3. Mikä on ioninvaihtokromatografia
4. Vertailu rinnakkain - affiniteetti vs. ioninvaihtokromatografia taulukkomuodossa
5. Yhteenveto

Mikä on affiniteettikromatografia?

Affiniteettikromatografia on biokemiallinen tekniikka, jota käytämme erottamaan komponentit seoksessa näiden komponenttien välisistä vuorovaikutuksista riippuen.

Tässä tapauksessa käyttämämme vuorovaikutukset sisältävät seuraavat:

1. Antigeenin ja vasta-aineiden vuorovaikutukset
2. Entsyymi-substraatti-vuorovaikutukset
3. Reseptoreiden ja ligandien vuorovaikutukset
4. Proteiini-nukleiinihappovuorovaikutukset

Tässä tekniikassa käytämme molekyylien molekyyliominaisuuksia tähän erotustekniikkaan. Tässä annamme halutun yhdisteen olla vuorovaikutuksessa stationaarisen faasin kanssa vedyn sitoutumisen, ionisen vuorovaikutuksen, disulfidisiltojen, hydrofobisen vuorovaikutuksen jne. Kautta. Molekyylit, jotka eivät ole vuorovaikutuksessa kiinteän faasin kanssa, eluoituvat ensin. Siksi voimme erottaa sen seoksesta. Haluttu yhdiste pysyy kiinnittyneenä kiinteään faasiin. Siksi voimme irrottaa sen eluointiliuottimella ja saada se eluoitumaan myös erottamiseksi.

Kuva 01: Kromatografiapylväs

Affiniteettikromatografia on hyödyllinen puhdistuksessa ja aineen konsentroinnissa seoksesta käyttämällä puskuriliuosta. Se on myös hyödyllinen seoksessa olevien ei-toivottujen aineiden vähentämisessä. Tarkasteltaessa laitteita, joita käytämme tähän prosessiin, meidän tulisi käyttää kolonnia, joka on täytetty paikallaan olevalla vaiheella. Sitten meidän pitäisi ladata liikkuva faasi, joka sisältää biomolekyylit, jotka aiomme erottaa. Anna seuraavaksi niiden sitoutua paikallaan olevan vaiheen kanssa. Sen jälkeen, käyttämällä pesupuskuria, voimme erottaa ei-kohdebiomolekyylit, mutta kohdemolekyyleillä tulisi olla korkea affiniteetti stationäärifaasiin erotusprosessin onnistumiseksi..

Mikä on ioninvaihtokromatografia?

Ionikromatografia on nestekromatografian muoto, jossa voimme analysoida ionisia aineita. Käytämme sitä usein epäorgaanisten anionien ja kationien (ts. Kloridi- ja nitraatti-anionien sekä kalium-, natriumkationien) analysoimiseksi. Vaikka se on vähemmän yleistä, voimme myös analysoida orgaanisia ioneja. Lisäksi voimme käyttää tätä tekniikkaa proteiinien puhdistamiseen, koska proteiinit ovat varautuneita molekyylejä tietyillä pH-arvoilla. Käytämme tässä kiinteää kiinteää faasia, johon varautuneet hiukkaset voivat kiinnittyä. Voimme esimerkiksi käyttää hartsipolystyreeni-divinyylibentseenikopolymeerejä kiinteänä kantajana.

Kuvio 02: Ioninvaihtokromatografian vaiheet

Tämän selittämiseksi edelleen, paikallaan olevassa faasissa on kiinteitä ioneja, kuten sulfaatti-anioneja tai kvaternäärisiä amiinin kationeja. Jokaisen tämän tulisi liittyä vastaioniin (ioniin, jolla on vastakkainen varaus), jos haluamme ylläpitää tämän järjestelmän neutraalisuutta. Tässä, jos vastaioni on kationi, nimeämme järjestelmän kationinvaihtohartsiksi. Mutta jos vastaioni on anioni, järjestelmä on anioninvaihtohartsi.

Ioninvaihtoprosessissa on viisi päävaihetta;

1. Alkuvaihe
2. Kohteen adsorptio
3. Eluoinnin aloittaminen
4. Eluoinnin loppu
5. uudistuminen

Mikä on affiniteetin ja ioninvaihtokromatografian ero??

Affiniteettikromatografia on biokemiallinen tekniikka, jota käytämme seosten komponenttien erottamiseen näiden komponenttien välisistä vuorovaikutuksista riippuen, kun taas ionikromatografia on nestekromatografian muoto, jossa voimme analysoida ionisia aineita. Siksi suurin ero affiniteetin ja ioninvaihtokromatografian välillä on se, että voimme käyttää ioninvaihtokromatografiaa vain ionisten aineiden erottamiseen, kun taas affiniteettikromatografia pystyy erottamaan sekä varautuneet että varautumattomat hiukkaset. Kun tarkastellaan työperiaatetta, affiniteetin ja ioninvaihtokromatografian erona on, että affiniteettikromatografia etenee johtuen siitä, että kohdemolekyyleillä on korkea affiniteetti stationäärifaasiin. Ioninvaihtokromatografiaa varten kohdemolekyyleillä on kuitenkin päinvastainen varaus kuin kiinteän faasin pinnalla.

Seuraava infografia esittää affiniteetin ja ioninvaihtokromatografian välisen eron vertailuna rinnakkain.

Yhteenveto - affiniteetti vs. ioninvaihtokromatografia

Yhteenvetona voidaan todeta, että affiniteetti ja ioninvaihtokromatografia ovat kahta nestekromatografiatekniikan muotoa. Tärkein ero affiniteetin ja ioninvaihtokromatografian välillä on, että voimme käyttää affiniteettikromatografiaa erottamaan seoksessa varatut tai lataamattomat komponentit, kun taas voimme käyttää ioninvaihtokromatografiaa erottamaan seoksen varautuneet komponentit.

Viite:

1. ”Affiniteettikromatografia.” Wikipedia, Wikimedia Foundation, 5. lokakuuta 2018. Saatavilla täältä 
2. Libretexts. "Ioninvaihtokromatografia." Kemia LibreTexts, Libretexts, 29. joulukuuta 2016. Saatavilla täältä  

Kuvan kohteliaisuus:

1. ”Nikkelihartsi” - kirjoittanut Pdcook - Oma työ, (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta 
2. ”Iex” kirjoittanut Daliak (Public Domain) Commons Wikimedian kautta