Ero happamien ja ei-hapokkaiden bakteerien välillä on pohjimmiltaan niiden soluseinämässä. Bakteerit tunnistetaan ja havaitaan yleensä erilaisilla värjäysmenetelmillä. Hapan nopeavärjäys on yksi sellaisista menetelmistä erottaa tietyn tyyppiset bakteerit muista. Tämän menetelmän löysivät ensin Franz Ziehl ja Friedrich Neelsen. Tuolloin tuberkuloosia aiheuttavaa Mycobacteriumia ei voitu värjätä ja havaita muilla värjäysmenetelmillä, kuten gram-värjäyksellä. Neelsen ja Ziehl värjäsivät nämä bakteerit lisäämällä fenolia (karboolihappoa) ja emäksistä fuksiinia (e) yhdessä hapan alkoholin kanssa, joten väriaine tunnetaan nimellä Carbol Fuchsin (e) -ratkaisu tai Ziehl - Neelsen-tahra.
Hapettavien ja happojen nopeajen bakteerien ymmärtämisen täydentämiseksi suoritetaan ensin värjäysmenettely. Haponkestävyys on bakteerin ominaisuus, joka kestää hapojen tai happoalkoholien värinmuutos värjäysmenettelyn aikana. Tätä kuvaa alun perin Paul Ehrlich. Värjäysvaiheen aikana suoritetaan seuraavat kolme vaihetta.
1. Ensisijaisen väriaineen levitys - Carbolfuchsin on primaarinen suulake, joka tulvii bakteereiden päälle, joka on lämpöä kiinnitetty puhtaalle objektilasille. Lämpöä käytetään varmistamaan väriaineen tunkeutuminen sytoplasmaan asti.
2. Värinpoisto - happo-alkoholikäsittely päävärin poistamiseksi.
3. Maalaus - Maalattu metyleenisinisellä värillisten bakteerien tarkastelemiseksi.
Bakteerit, joilla on haponkestävyys tunnetaan haponkestävinä bakteereina. Toisin sanoen bakteereja, jotka värjätään vielä punaisella värillä värinpoistovaiheen jälkeen hapon nopeavärjäysmenettelyn aikana, kutsutaan haponkestäviksi bakteereiksi. Mikä tekee näistä bakteereista haponkestäviä? No, jos tarkastellaan hapannopeuden bakteerin poikkileikkausta soluseinästä, se voidaan helposti ymmärtää.
Hapan nopea tahra (tai karbolfukssiini) sitoutuu vain bakteereihin, joilla on vahamainen soluseinä. Tämä soluseinä sisältää hydrofobista vahamaista lipidiä, joka tunnetaan nimellä mykolihappo, joka miehittää 60% soluseinämästä. Hydrofobisen ominaisuuden vuoksi vesiliukoisten aineiden pääsy sytoplasmaan on estetty. Siksi tätä bakteereja ei voida värjätä vesiliukoisilla väriaineilla, kuten metyleenisinisellä. Carbolfuchsin koostuu fenolista ja fuksiinista siten, että se voidaan tunkeutua sytoplasmaan saakka.
Hapan alkoholin värinpoistovaiheen aikana hapan alkoholi estyy pääsemästä sytoplasmaan hydrofobisen mykolihapon läsnäolon vuoksi, joten se ei pysty poistamaan karbolfuksiinia bakteerisolusta. Joten primaariväriaine pysyy sytoplasmassa jopa värinpoistovaiheen jälkeen.
Happoon nopeaan bakteeriin kuuluu useita suvuja, kuten Mycobacterium ja Nocardia, jotka ovat patogeenisiä ihmisille ja aiheuttavat vastaavasti tuberkuloosin ja nocardiosis.
Acid Fast -bakteerit ovat punaisia
Jos bakteerista puuttuu haponkestävyys sitä kutsutaan happamaksi nopeaksi bakteereksi. Hapon nopeavärjäysmenettelyn noudattamisen jälkeen nämä bakteerit värjäävät sinisellä. Tämä johtuu siitä, että hapottomilla nopeilla bakteereilla on ohut soluseinä ja niistä puuttuu mykolihappoa soluseinämässä. Tämä sallii karbolfukssiinin tunkeutumisen sytoplasmaan. Se poistetaan kuitenkin happamalla alkoholikäsittelyllä, mikä tekee happamaton nopeasti kulkevista bakteerisoluista värittömiä. Metyleenisinisestä on tässä hyötyä hapettavien bakteereiden selkeän havaitsemiseksi ja erottamiseksi niistä.
Hapoton nopea bakteereja voidaan värjätä käyttämällä gram-tahraa tai mitä tahansa muuta yksinkertaista värjäysmenettelyä. Esimerkkejä happamattomista nopeista bakteereista ovat Escherichia coli, Pseudomonas sp.
Ei happamat nopeat bakteerit ovat sinisessä värissä
• Haponkestävät bakteerit osoittavat haponkestävyyttä.
• Happapitoisista bakteereista puuttuu haponkestävyys.
• Hapan nopeasti bakteerit sisältävät paksun soluseinän, jossa on mykolihappikerros.
• Happohappottomista bakteereista puuttuu tämä kerros.
• Happamia bakteereja on vaikeampi värjätä grammaaralla.
• Ei-happamat nopeasti bakteerit voidaan värjätä gramma-tahralla.
• Suurin osa haponkestävistä bakteereista on patogeenisiä.
• Ei happamat nopeabakteerit voivat olla patogeenisiä tai ei-patogeenisiä.
• Hapan nopeasti bakteerit ovat enimmäkseen bakteereja.
• Ei happamat nopeat bakteerit voivat olla baciileja tai cocci-bakteereja.
Kuvat kohteliaisuus: