Ero RT-PCR n ja QPCR n välillä

Käänteistranskription polymeraasiketjureaktio (RT-PCR)

RT-PCR vs. QPCR

Biotekniikan edistyminen on johtanut siihen, että on löydetty useita tapoja selviytyä elinsiirtojen vaatimuksista vuosien varrella. Ennen henkilö, joka luovuttaisi vapaaehtoisesti minkä tahansa elimen heti kuoleman jälkeen apua tarvitsevalle potilaalle, sai vain aloittaa siirrännäisen. Biologien jatkuvat tutkimukset ja tutkimukset johtavat kantasolujen löytämiseen.

Kantasoluilla tarkoitetaan soluja, jotka otetaan alkion DNA: sta, mikä toimii lähteenä niiden solujen uudistamiselle, jotka periaatteessa olisivat sen elimen klooni, josta DNA on otettu. Vaikka ihmisoikeusaktivistit ajavat tällaisten menettelyjen lopettamista, onnistuneet toimenpiteet ovat todellakin osoittaneet kantasolukehityksen tehokkuuden elinsiirtoissa.

Ennen kuin kantasoluja voidaan ymmärtää ja ymmärtää täysin, on kuitenkin tutustuttava tähän tieteelliseen keksintöön liittyviin erilaisiin terminologioihin. Kantasolujen viljely käsittelee DNA: ta ja sen koodausta. Siksi opiskelijoille tai kenelle tahansa kiinnostuneille henkilöille on tärkeää erottaa toisistaan ​​RT-PCR ja qPCR.

Käänteistranskription polymeraasiketjureaktio (RT-PCR) on yksi monista polymeraasiketjureaktion tai PCR: n varianteista. Tätä laboratoriotekniikkaa käytetään laajasti molekyylibiologiassa, jotta tutkijat tuottavat useita kopioita tietystä DNA-sekvenssistä prosessilla, jota kutsutaan nimellä "monistus". Ero RT-PCR: n ja perinteisen PCR: n välillä on se, että RNA transkriptoidaan ensin käänteisesti sen DNA-komplementtiin, joka käyttää käänteistranskriptaasia. Uusi komplementaarinen DNA, joka sisältää käänteisen transkription, monistetaan sitten käyttämällä perinteistä PCR- tai reaaliaikaista PCR: ää.

Useimmat tätä prosessia opiskelevat opiskelijat tekevät usein virheen vaihtaa käänteistranskription PCR ja reaaliaikainen PCR, koska nämä kaksi lyhennetään samalla tavalla. Sekaannusten välttämiseksi biologit merkitsevät reaaliaikaisen PCR: n kvantitatiivisena reaaliaikaisena PCR: nä tai qPCR: nä.

QPCR eroaa suuresti RT-PCR: stä, koska qPCR on vastuussa amplifikaation mittaamisesta sen tapahtuessa. Voidaan sanoa, että RT-PCR käynnistää monistusprosessin, kun taas qPCR mittaa sen menettelyn tapahtuessa.

Kvantitatiivinen reaaliaikainen PCR

QPCR on todella mullistanut perinteisen yksisuuntaisen lähestymistavan, kun on kyse DNA: n ja RNA: n kvantifioinnista, koska qPCR-menetelmän soveltaminen antaa biologille mahdollisuuden määrittää nukleiinihapon alkuperäinen pitoisuus jo ennen reaktion tulosten havaitsemista ja kirjataan alas.

QPCR: n, jota pidetään nykyään tehokkaimpana ja herkimmänä analyysitekniikana geenitutkimuksissa, soveltaminen on laajentunut huomattavasti. Se osallistuu tällä hetkellä kvantitatiiviseen geeniekspressioanalyysiin, genotyyppien määritykseen, patogeenien havaitsemiseen ja SNP-analyysiin sekä RNA-interferenssimittauksiin.

QPCR yhdistetään usein käänteiskopiointimenettelyyn tarkkailija-RNA: n ja MicroRNA: n kvantifioimiseksi havaittujen ja kokeiltujen kudosten soluissa. Tämä antaa sitten toisen näkyvän eron näiden kahden välillä: RT-PCR: ää voidaan käyttää monistusprosessissa, mutta se on fuusioitava qPCR: n kanssa kvantitatiivista määrittämistä varten.

QPCR: n tiedetään myös olevan kvantitatiivisempi, koska tietoja voidaan kerätä PCR: n eksponentiaalisen kasvu- (log) vaiheen edetessä. Biologit huomauttavat, että PCR: n sivutuotteen määrä on suoraan verrannollinen templaatinukleiinihapon määrään, joka mitataan qPCR: n avulla..

Toisaalta, RT-PCR: llä ei ole kaukana kvantitatiivista luonnetta, koska monistetun nauhan intensiteetin havaitseminen geelissä pitoisuuden asetettua standardia noudattaen voi johtaa "puolikvantitatiivisiin" päätelmiin.

Yhteenveto:

1.QPCR ja RT-PCR ovat molemmat termit, joita käytetään biotekniikassa ja joita käytetään useiden DNA-kopioiden tuottamiseen.
2.RT-PCR: ää käytetään monistamaan DNA-koodin käänteinen transkriptio; QPCR mittaa vahvistusta.
3.RT-PCR on tarkoitettu monistamiseen, kun taas qPCR on kvantifiointiin.
4.QPCR on luonteeltaan kvantitatiivinen, kun taas RT-PCR ei ole.