Transformaatio vs.
Transformaatio ja transfektio ovat kaksi yksinkertaista tekniikkaa, joita käytetään vieraan geenin viemiseksi isäntäsoluun. Nämä tekniikat riippuvat kuitenkin isäntä- tai vektorijärjestelmien tyypistä.
Mikä on solunmuutos?
Transformaatio on tekniikka, jota käytetään geenien tuomiseen hiiva- ja bakteerisoluihin. Tämä tekniikka aiheuttaa yleensä periytyviä muutoksia geeneissä, ja siten geenin ilmentyminen on pysyvää. Bakteerimuuntaminen otettiin ensimmäisen kerran käyttöön vuonna 1928 Frederick Griffith. Sitten 1970-luvun alussa tätä tekniikkaa käytettiin vuonna E. coli. Muuntoprosessin aikana E. coli, solut liotetaan jääkylmässä CaCl-liuoksessa2. Tämä vaihe tekee E. coli solut pätevät. Sen jälkeen toimivaltaiset solut sekoitetaan plasmidi-DNA: n kanssa ja inkuboidaan jäillä 20-30 minuutin ajan. Sitten annetaan lyhyt lämpöisku, jotta voidaan siirtää DNA: ta soluun. Lopuksi solut laitetaan ravintoliemeen ja inkuboidaan 37 ° C: ssa 60-90 minuutin ajan plasmidien muodostamiseksi. Kun nämä vaiheet on suoritettu onnistuneesti, transformoidut solut voidaan laittaa sopivalle alustalle solujen lisäämiseksi. Koska transformaatiota pidetään tehottomana tekniikkana, sitä ei voida käyttää kloonipankkien valmistukseen.
Mikä on solutransfektio?
Transfektio on menetelmä vieraan geenin viemiseksi yleensä nisäkässoluihin. Transfektiota on olemassa kaksi menetelmää; nimittäin ohimenevä transfektio ja vakaa transfektio. Ohimenevässä transfektiossa geeniekspressio on saatavana rajoitetun ajan; siten geenin muutos aiheuttaa väliaikaisen ilmentymisen. Tämä transfektiomenetelmä on yksinkertainen ja nopea; joten sitä voidaan käyttää rutiininomaisesti. Yksi ohimenevän transfektion haitoista on vaikeus hakea laajamittaisia proteiinisynteesijärjestelmiä.
Stabiilin transfektion aikana kohdegeeni integroituu isäntäsolun genomiin, ja siten geeniekspressio on pysyvää, toisin kuin ohimenevä transfektio.
Mikä on ero transformoitumisen ja transfektion välillä??
• Transformaatio on geenin vieminen prokaryoottiseen soluun (bakteeri- ja hiiva), kun taas transfektiota kutsutaan yleensä geenin viemiseksi nisäkässoluun.
• Transformaatio johtaa geenien periytyvään muutokseen, kun taas transfektio voi johtaa geenien väliaikaiseen ilmentymiseen tai pysyviin muutoksiin.