Ero Taq-polymeraasin ja DNA-polymeraasin välillä

Avainero - Taq-polymeraasi vs. DNA-polymeraasi
 

DNA-polymeraasi on entsyymi, joka luo uuden DNA: n rakennuspalikoistaan ​​(nukleotideista). Prokaryooteissa ja eukaryooteissa löytyy erityyppisiä DNA-polymeraaseja. DNA: n päällekkäisyys on mahdollista näiden erityisten entsyymien läsnäolon vuoksi, ja geneettinen informaatio välitetään jälkeläisille DNA-polymeraasien vaikutuksella. Taq-polymeraasi on erityinen DNA-polymeraasin tyyppi, joka on lämpöstabiili ja jota käytetään laajasti PCR: ssä. Taq-polymeraasi löytyy termofiilisistä bakteereista ja puhdistetaan in vitro DNA kopiointi. avainero Taq-polymeraasin ja DNA-polymeraasin välillä on se Taq-polymeraasi kestää korkeita lämpötiloja denaturoitumatta, kun taas muut DNA-polymeraasit denaturoituvat korkeissa lämpötiloissa (proteiineja hajottavissa lämpötiloissa).

SISÄLLYS
1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mikä on Taq-polymeraasi
3. Mikä on DNA-polymeraasi
4. Vertailu rinnakkain - Taq-polymeraasi vs. DNA-polymeraasi
5. Yhteenveto

Mikä on Taq-polymeraasi?

Taq-polymeraasi (Taq-DNA-polymeraasi) on entsyymi, jota käytetään DNA: n syntetisointiin in vitro PCR-tekniikalla. Sitä tuottaa termofiilinen bakteeri nimeltään Thermus aquaticus joka asuu kuumissa lähteissä ja lämpöaukkoissa. Taq-polymeraasi on lämpöstabiili entsyymi, joka ei hajoa korkeissa lämpötiloissa. Taq-polymeraasi puhdistettiin ensimmäistä kertaa ja julkaistiin lehdessä Chien et ai. vuonna 1976. PCR-tekniikka suoritetaan Taq-polymeraasin avulla, koska se kykenee sietämään korkeita lämpötiloja ja lämpötilanvaihteluita PCR: n aikana. Taq-polymeraasi katalysoi DNA-synteesiä, kun siellä on alukkeita, nukleotideja ja yksijuosteista templaatti-DNA: ta. Entsyymi koostuu yhdestä polypeptidistä, jonka molekyylipaino on noin 94 kDa. Taq-polymeraasi osoittaa optimaalisen aktiivisuutensa 80 ° C: ssa ja pH-alueella 7 - 8, kun läsnä on magnesiumioneja. Sillä on sekä polymeraasi- että eksonukleaasiaktiivisuutta. Entsyymi koostuu yhdestä polypeptidiketjusta ja Taq-polymeraasin geeni sisältää korkeat G- ja C-pitoisuudet (67,9%).

Lämpöstabiili Taq-polymeraasi mahdollistaa PCR: n suorittamisen korkeissa lämpötiloissa, jotka lisäävät alukkeiden spesifisyyttä ja vähentävät ei-toivottujen PCR-tuotteiden (alukedimeerien) tuottamista. Taq-polymeraasi eliminoi myös tarpeen lisätä uusia entsyymejä PCR-reaktioon jokaisen PCR-reaktiojakson jälkeen, koska se kykenee kestämään korkeita lämpötiloja. Taq-polymeraasin löytäminen mahdollisti PCR: n suorittamisen yhdessä suljetussa putkessa suhteellisen yksinkertaisessa koneessa. Näiden Taq-polymeraasin ominaisuuksien vuoksi PCR: stä tulee suosittu rutiininomaisesti suoritettava laboratoriotekniikka monissa molekyylibiologisissa analyyseissä, jotka koskevat DNA-analyysiä.

Taq-polymeraasia käytetään laajasti molekyylibiologisissa tekniikoissa, ja tarvitaan laajamittaista Taq-polymeraasin tuotantoa. Siksi, käyttämällä rekombinantti-DNA-tekniikkaa ja geenikloonausta, Taq-DNA-polymeraasia koodaava geeni oli kloonattu ja ekspressoitu Escherichia coli. Tämä on helpottanut suuresti rekombinantti-Taq-polymeraasin tuotantoa ja vähentänyt tämän entsyymin hintaa riittävää käyttöä varten.

Kuvio 1: Taq-polymeraasi

Mikä on DNA-polymeraasi?

DNA-polymeraasi on entsyymi, joka katalysoi DNA: n synteesiä nukleotideista. Se on tarkin entsyymi, joka vastaa genomien kopioimisesta ja geneettisen tiedon välittämisestä jälkeläisille. Solujen jakautumisen aikana DNA-polymeraasi kopioi koko DNA: nsa ja välittää yhden kopion jokaiselle tytärsolulle. Vuonna 1955 Arthur Kornberg löydettiin DNA-polymeraasista E Coli. DNA-polymeraasin toiminta riippuu useista vaatimuksista; templaatti-DNA, Mg⁺² ionit, kaikki neljä deoksinukleotidityyppiä (dATP, dTTP, dCTP ja d GTP) ja lyhyt RNA-sekvenssi (aluke). DNA: n synteesi suoritetaan suuntaan 5'-3 'DNA-polymeraasin avulla.

DNA-polymeraasit voidaan ryhmitellä seitsemään eri perheeseen: A, B, C, D, X, Y ja RT (käänteistranskriptaasi). Retrovirukset koodaavat RT: tä; epätavallinen DNA-polymeraasi, joka tarvitsee RNA-templaatin DNA-synteesiin. Prokaryooteista löytyy viisi erityyppistä DNA-polymeraasia erilaisille rooleille DNA-replikaatiossa. DNA-polymeraasi 3 on vastuussa uuden DNA-juosteen polymeroinnista. DNA-polymeraasi 1 vastaa DNA: n korjaamisesta ja korjaamisesta. DNA-polymeraasit 2, 4 ja 5 vastaavat DNA: n korjaamisesta ja oikolukusta. Eukaryooteissa on 15 erityyppistä DNA-polymeraasia. Heihin kuuluu viisi suurta perhettä.

Kuvio 2: DNA-polymeraasi

DNA-polymeraaseja käytetään geenien kloonauksessa, PCR: ssä, DNA-sekvensoinnissa, SNP-havainnoinnissa, molekyylidiagnostiikassa jne..

Mikä on ero Taq-polymeraasin ja DNA-polymeraasin välillä?

Taq-polymeraasi vs. DNA-polymeraasi
Taq DNA-polymeraasi on entsyymi, joka luo DNA: ta. Se on lämpöstabiili entsyymi, jota löydetään termofiileistä	DNA-polymeraasi on entsyymi, joka helpottaa DNA: n replikaatiota ja jota esiintyy sekä prokaryoottisissa että eukaryoottisissa organismeissa.
Hajoaminen korkeissa lämpötiloissa
Taq-polymeraasi on aktiivinen korkeissa lämpötiloissa.	DNA-polymeraasit hajoavat proteiineissa, jotka denaturoivat korkeita lämpötiloja.
Käyttää
Tätä käytetään laajalti PCR: ssä	Taq-polymeraasi korvasiDNA-polymeraasin coli alun perin käytetty PCR: ssä.

Yhteenveto - Taq-polymeraasi vs. DNA-polymeraasi

DNA-polymeraasit ovat entsyymejä, jotka syntetisoivat DNA: ta deoksinukleotideistä (DNA: n rakennuspalikoista), kun templaatti ja alukkeet ovat saatavilla. DNA-polymeraaseja tarvitaan solujen DNA: n kopioimiseksi ja kulkemiseksi identtisiksi tytärsoluiksi solunjaon aikana. DNA-polymeraasit lisäävät uusia nukleotideja alukkeen 3'-päähän ja pidentävät uuden DNA-juosteen synteesiä suuntaan 5 '- 3'. Taq DNA-polymeraasi on yksi DNA-polymeraasientsyymeistä, joka on erittäin käyttökelpoinen polymeraasiketjureaktio (PCR) -menetelmässä DNA: n monistamiseksi. E. coli DNA-polymeraasia 1 käytettiin aikaisemmin PCR: ään, mutta kaupallinen Taq-polymeraasi hylkäsi sen johtuen sen alukkeen sitoutumisen korkeasta spesifisyydestä korotetuissa lämpötiloissa ja halutun tuotteen suuremman saannon tuottamisen vähemmän epäspesifisellä monistustuotteella. Tämä on ero Taq-polymeraasin ja DNA-polymeraasin välillä.

Viite:
1.Ishino, Sonoko ja Yoshizumi Ishino. "DNA-polymeraasit hyödyllisinä reagensseina bioteknologialle - alan kehitystutkimuksen historia." Mikrobiologian rajat. Frontiers Media S.A., 2014. Web. 28. helmikuuta 2017
2 "Taq ja muut lämpöstabiilit DNA-polymeraasit." Springer, Springer Hollanti, 1. tammikuuta 1970. Verkko, 28. helmikuuta 2017
3.Stillman, Bruce. "DNA-polymeraasit replikaatiohaarukassa eukaryooteissa." Molekyylisolu. Yhdysvaltain kansallinen lääketieteellinen kirjasto, 9. toukokuuta 2008. Web. 28. helmikuuta 2017
4.EukaryoottisetDNAPolymeraasit - Oxfordin yliopisto. ” N.p., n.d. Web. 28. helmikuuta 2017

Kuvan kohteliaisuus:
1. Adenosinen “Taq” - Oma työ (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta
2. ”DNA-polymeraasi” Yikrazuul - Oma työ (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta