Suurin osa tutkimuksista liittyy eläinsolujen viljelyyn, joten nämä tutkimukset vaativat eläinsolulinjojen ylläpitämistä erityisissä kasvuolosuhteissa. Eläinsolujen viljelyä tehdään laajasti farmakologisissa tutkimuksissa lääkeaineenvaihdunnan tunnistamiseksi, tautien diagnosoinnissa ja syöpätutkimuksissa. Soluviljelyalusta on tärkeä osa eläinsoluviljelmää. Dulbeccon modifioitu kotkaväliaine (DMEM) ja Roswell Park Memorial Institute -medium (RPMI) ovat kaksi viljelyalustaa, joita käytetään eläinsolujen viljelyssä. RPMI on alusta, jota käytetään laajasti nisäkässolujen viljelyyn suspensioviljelmässä. DMEM on modifioitu tyyppi perusaineesta, jossa aminohappo- ja vitamiinipitoisuudet ovat lisääntyneet jopa nelinkertaiseksi. DMEM: ää käytetään solujen viljelyyn kiinnittyneissä viljelmissä. Keskeinen ero näiden kahden median välillä on median kulttuurityyppi. RPMI: tä käytetään suspensioviljelmissä, kun taas DMEM: tä käytetään tarttuvien solujen viljelyyn.
1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mikä on RPMI
3. Mikä on DMEM
4. RPMI: n ja DMEM: n samankaltaisuudet
5. Vertailu rinnakkain - RPMI vs. DMEM taulukkomuodossa
6. Yhteenveto
RPMI tai Roswell Park Memorial Institute Medium kutsutaan myös nimellä RPMI 1640. Median nimi on johdettu instituutista, josta tiedotusvälineet löydettiin. Tätä väliainetta käytetään yleisesti eläinsoluviljelmässä, erityisesti nisäkässolujen kasvuun. Ne kehitettiin alun perin kasvattamaan ihmisen lymfosyyttejä.
Seuraavat aineosat sisältyvät RPMI: hen.
RPMI: n erityispiirre on lisääntynyt fosfaattipitoisuus väliaineessa. RPMI: tä käytetään 5%: n hiilidioksidi-ilmakehässä. Tämä tarjoaa maksimaaliset ja optimaaliset olosuhteet solukasvulle. Elatusaineen pH pidetään 8,0: ssa bikarbonaattipuskurijärjestelmällä.
Kuvio 01: Soluviljelmä Petri-lautasella
Dulbeccon modifioitu kotkan väliaine (DMEM) on modifioitu väliaine, jota valmistetaan kaupallisesti. Keskipitkän jauheen alkuperäinen rakenne on keltainen. DMEM: ssä vitamiinipitoisuus nousee nelinkertaiseksi, mikä lisää ravintoalustan pitoisuutta väliaineessa.
DMEM: ää muutetaan myös lisäämällä lisää suoloja, kuten rautanitraattia, natriumpruvaattia ja joitain ei-välttämättömiä aminohappoja, kuten seriini ja glysiini. Myös glukoosin formulaatio väliaineessa on muuttunut. Alkuperäinen formulaatio koostuu 1000 mg / l glukoosista, kun taas DMEM: ssä konsentraatio kasvaa arvoon 4500 mg / l. DMEM vaatii myös seerumiväliaineen täydentämistä, koska se ei ole täydellinen väliaine. Yleensä DMEM: ää täydennetään naudan sikiön seerumilla (FBS). FBS tarjoaa viljelyprosessille tarvittavat proteiinit ja kasvutekijät.
Elatusaineen pH vaihtelee lisättäessä natriumbikarbonaattia. Elatusaineen pH ennen natriumbikarbonaatin lisäämistä on noin 6,80 - 7,40, kun taas natriumbikarbonaatin lisäämisen jälkeen pH on alueella 7,60 - 8,20. Väliaineen varastointilämpötila on 2 - 8 0C.
Kuvio 02: DMEM
RPMI vs. DMEM | |
RPMI on väliaine, jota käytetään laajasti nisäkässolujen viljelyyn suspensioviljelmässä. | DMEM on modifioitu tyyppi perusaineesta, jolla on lisääntyneet aminohappo- ja vitamiinipitoisuudet. |
Ylimääräisten fosfaattien läsnäolo | |
Läsnä RPMI: ssä. | Ei DMEM: ssä. |
Käyttää | |
| Käytetään solujen viljelyyn kiinnittyneissä viljelmissä. Se on tottunut,
|
Kulttuurityypit | |
RPMI: tä käytetään suspensioviljelmiin. | DMEM: tä käytetään viljelmiin, joissa solu on kiinnittynyt. |
Sekä RPMI: tä että DMEM: ää käytetään laajasti eläinsolujen viljelyssä erityisesti eläinsolulinjojen viljelyyn, mukaan lukien lymfosyytit in vitro. DMEM on modifioitu perusaine, jossa ravintoainepitoisuus on lisääntynyt. RPMI, jonka on kehittänyt Roswell Park Memorial Institute, ja se on myös väliaine, jota käytetään eläinsolujen viljelyssä erityisesti nisäkäslymfosyyteille. Molemmat tiedotusvälineet ovat kaupallisesti saatavissa. Tämä on ero RPMI: n ja DMEM: n välillä.
1. ”RPMI Media - RPMI-1640 Media.” Sigma-Aldrich. Saatavilla täältä
2. “Dulbeccon modifioidun kotkan väliaine - DME, DMEM.” Sigma-Aldrich. Saatavilla täältä
1.'Solukulttuuri pienessä Petri dis'By kaibara87 -lehdessä - alun perin lähetetty Flickrille soluviljelmäksi (CC BY 2.0) Commons Wikimedian kautta
2.DMEM-soluviljelyalustaBy Lilly_M - Oma työ (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta