Ero käänteisfaasin ja normaalin vaiheen HPLC n välillä
Share
avainero käänteisfaasin ja normaalin vaiheen HPLC: n välillä on, että käänteisfaasi-HPLC käyttää polaarista stationäärivaihetta ja vähemmän polaarista liikkuvaa vaihetta, kun taas normaalifaasi-HPLC käyttää ei-polaarista kiinteää vaihetta ja polaarista liikkuvaa vaihetta.
Normaalifaasin HPLC on vanhin HPLC-tekniikka, jota Tswett käytti kasviuutteiden erotuksissa; hän käytti liitua lasipylväässä. Tämä oli klassinen kromatografiamuoto, joka johti nimeämään se ”normaaliksi” tekniikaksi. Käänteisen vaiheen HPLC on toisaalta vastakohta tavanomaiselle tekniikalle, jota tutkijat ovat viime aikoina kehittäneet.
SISÄLLYS
1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mikä on käänteisfaasi-HPLC
3. Mikä on normaalifaasi HPLC
4. Vertailu rinnakkain - käänteisfaasi vs. normaalifaasin HPLC taulukkomuodossa
5. Yhteenveto
Mikä on käänteisfaasi-HPLC?
Käänteisen faasin HPLC on kromatografinen tekniikka, jossa käytämme hydrofobista stationäärifaasia. Kaikista HPLC-menetelmistä käytämme tätä menetelmää noin 70%: iin sen laajan käytettävyyden ja toistettavuuden vuoksi. Kiinteä vaihe on ei-polaarinen ja liikkuva vaihe on polaarinen.
Useimmiten tutkijat käyttävät vesipitoista vesiseosta sekoittuvan, polaarisen orgaanisen liuottimen, kuten asetonitriilin tai metanolin, kanssa liikkuvana faasina. Siksi analyytit ovat vuorovaikutuksessa ei-polaarisen stationäärivaiheen kanssa.
Mikä on normaalifaasi HPLC?
Normaalifaasin HPLC on kromatografinen tekniikka, jossa käytämme hydrofiilistä kiinteää faasia. Se on perinteinen HPLC-menetelmä, vaikka emme käytä sitä niin paljon. Kiinteä vaihe on polaarinen ja liikkuva vaihe on polaarinen. Vielä tärkeämpää on, että tämän tekniikan liikkuva vaihe on 100% orgaaninen. Se tarkoittaa, että tähän ei käytetä vettä.
Kuva 01: Näyteprofiili normaalifaasi- ja käänteisfaasi-HPLC-kromatogrammeille analyytin komponenttien polaarisuuden mukaan.
Tyypillisesti paikallaan oleva faasi sisältää piidioksidia, syaania, diolia, aminosidottuja faaseja jne. Liikkuvat faasit sisältävät orgaanisia liuottimia, kuten heksaania, etyyliasetaattia jne. Tämä tekniikka perustuu liuottimen tai analyyttimolekyylien pidättämiseen polaariseen kiinteään faasiin..
Mikä on ero käänteisfaasin ja normaalin vaiheen HPLC: n välillä??
Käänteisen faasin HPLC on kromatografinen tekniikka, jossa käytämme hydrofobista stationäärifaasia. Tämän tekniikan kiinteä vaihe on ei-polaarinen. Kiinteä vaihe on polaarinen, kun taas liikkuva vaihe on polaarinen. Lisäksi tutkijat käyttävät vesipitoista vesiseosta sekoittuvan, polaarisen orgaanisen liuottimen, kuten asetonitriilin tai metanolin kanssa, liikkuvana faasina käänteisfaasi-HPLC: ssä. Kun taas normaalifaasi HPLC on kromatografinen tekniikka, jossa käytämme hydrofiilistä kiinteää faasia. Tämän tekniikan kiinteä vaihe on polaarinen. Paikallinen vaihe on polaarinen, kun taas liikkuva vaihe on polaarinen. Lisäksi tutkijat käyttävät normaalifaasin HPLC: n liikkuvana faasina orgaanisia liuottimia, kuten heksaania, etyyliasetaattia jne. Alla oleva infografia esittää taulukon muodossa käänteisfaasin ja normaalin vaiheen HPLC: n välisen eron.
Yhteenveto - Käänteinen faasi vs. normaalifaasi HPLC
Käänteisen vaiheen ja normaalifaasin HPLC-tekniikat ovat kaksi nestekromatografiatekniikkaa. Ero käänteisfaasin ja normaalin vaiheen HPLC: n välillä on se, että käänteisfaasi HPLC käyttää polaarista stationäärivaihetta ja vähemmän polaarista liikkuvaa vaihetta, kun taas normaalifaasin HPLC käyttää ei-polaarista stationaarista vaihetta ja polaarista liikkuvaa vaihetta..
Viite:
1. Vesi. “HPLC-erottelutilat.” HPLC - Suorituskykyinen nestekromatografia selitetty: vesialueet. Saatavilla täältä
