avainero insertio- ja korvaavien vektoreiden välillä on, että insertiovektorilla on kyky insertoida kohtuullisen pituisia vieraita DNA: ita, kun taas korvaavalla vektorilla on kyky sijoittaa suurempia pituuksia vieraita DNA: ta.
Faagivektorit ovat kloonaamiseen käytettyjä bakteriofageja. Faagivektoreita on kahta tyyppiä; ne ovat insertiovektori ja korvaava vektori. Lisäksi kaikki faagivektorit koostuvat ei-välttämättömistä geeneistä. Nämä geenit on kuitenkin poistettava faagista uusien vieraiden DNA-inserttien helpottamiseksi.
1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mitkä ovat lisäysvektorit
3. Mitkä ovat korvaavat vektorit
4. Yhdenmukaisuudet lisäys- ja vaihtovektorien välillä
5. Vertailu rinnakkain - lisäys vs. korvaavat vektorit taulukkomuodossa
6. Yhteenveto
Ensinnäkin insertiovektori on lambda-kloonausvektorien yksinkertaisin muoto. Itse asiassa se on tietyn tyyppinen faagivektori, jolla on ainutlaatuinen restriktiokohta, joka on viety vektorin genomiin valinnaisen DNA: n asemaan. Lisäksi faagi-DNA pysyy ilman poistoa. Tämä faagi-DNA: n poistumattomuus supistaa vektoriin kloonattavien inserttien (vieraan DNA: n) kokoa. Lisäksi nämä vektorit ovat käyttökelpoisia cDNA: n kloonauksessa ja ekspressiossa. GT10, GT11 ja Zap ovat esimerkkejä tästä vektorista.
Kuva 01: lambdafaagi
Lisäysvektori koostuu yhdestä tunnistuspaikasta. Tämän vektorin ensisijainen tehtävä on kehittää cDNA-kirjastoja, jotka on johdettu eukaryoottisista mRNA-sekvensseistä. Lisäksi se mahtuu vain vieraan DNA: n pituuksiin, jotka ovat välillä 5 - 11 kb. Sillä on myös ainutlaatuinen pilkkoutumiskohta vieraan DNA: n insertoimiseksi.
Korvaava vektori tai korvausvektori "Faagi-vektori" on tyyppi faagivektori, joka on kehitetty poistamalla faagi-DNA: n keskimääräinen "täyteainefragmentti" -alue. Haluttu vieras DNA-insertti korvaa faagi-DNA: n.
Kuva 02: Korvaava vektori
Korvaavat vektorit ovat tärkeitä genomisten kirjastojen, kuten EMBL4 ja Charon40, luomisessa. Nämä vektorit mahtuvat suurempaan vieraan DNA: n pituuteen, joka vaihtelee välillä 08 - 24 kb. Täytealue koostuu myös geenistä, joka tekee faagivektorista elinkyvyttömän bakteeri-isännän sisällä.
Lisäys vs. korvaavat vektorit | |
Insertiovektori on tyyppi faagi-vektori, jossa on restriktiokohta viety faagin genomiin valinnaisen DNA: n kohtaan. | Korvaava vektori on tyyppi faagivektori, joka on kehitetty poistamalla faagi-DNA: n keskimääräinen "täytefragmentti" -alue. |
Lisäosien koko | |
Pituus 05-11 kb | Pituus 08-24 kb |
Täytefragmentti | |
Ei täyteainetta | Täytefragmentti korvataan vieraalla insertillä |
Toimia | |
Tärkeää cDNA-kirjastojen luominen | Tärkeää perimäkirjastojen luomisessa |
esimerkit | |
GT10, GT11 ja Zap ovat esimerkkejä | EMBL4 ja Charon40 ovat esimerkkejä |
Raivauspaikka | |
Läsnä on ainutlaatuinen pilkkoutumiskohta | Halkaisupaikka sisältää geenejä, jotka eivät ole välttämättömiä lyyttisen syklin kannalta |
Sekä insertio- että korvaavat vektorit ovat kahden tyyppisiä faagivektoreita. Molemmilla vektoreilla on restriktiopaikkoja, jotka helpottavat uusien vieraiden DNA-inserttien sijoittamista. Lisäysvektorit ovat tärkeitä luomalla cDNA-kirjastoja, kun taas korvaavat vektorit ovat tärkeitä luomalla genomisia kirjastoja. Lisäksi insertiovektorit mahtuvat DNA-insertteihin, joilla on kohtalainen pituus. Mutta korvaavat vektorit voivat mahtua pidempiä vieraita DNA-inserttejä. Kaiken kaikkiaan tämä on avainero insertio- ja korvausvektorien välillä.
1. Hasty, P, et ai. "Lisäyksen tehokkuus vaihtosuuntautuneisiin vektoreihin kohdistamisen suhteen vaihtelee eri kromosomaalisilla alueilla." Molecular and Cellular Biology, US National Library of Medicine, joulukuu 1994, saatavana täältä.
2. ”Lambda-lisäysvektorit.” Biology 335 Luennot - Lambda-vektorit, saatavana täältä.
3. ”Korvaava vektori”. Korvaava vektori - Vaihtovektorin - GenScript-molekyylibiologian terminologia, saatavana täältä.
1. ”Lambda-faagi” Lizanne Koch - oma työ ChemBioDraw (Public Domain) kanssa Commons Wikimedian kautta