Ero in situ -hybridisaation ja immunohistokemian välillä

Keskeinen ero - tilannehybridisaatio vs. immunohistokemia
 

Syövän ja tartuntatautien diagnosointi on suosittu suuntaus, jossa uusia proteomiikka- ja genomipohjaisia ​​tekniikoita käytetään kasvaimien tai tarttuvien solujen, niiden lisääntymisen ja solukehityskohtien tunnistamiseen ja tarttuvien ja ei-tarttuvien tautien geneettisen perustan analysointiin. Tämä johtaa tarkkaan lääkkeiden käsittelyyn ja suunnitteluun sekä räätälöityjen hoitomenetelmien kehittämiseen sairauksille. In situ -hybridisaatio (ISH) ja immunohistokemia (IHC) ovat kaksi tällaista laajalti käytettyä tekniikkaa syöpäbiologiassa, ja keskeinen ero in situ -hybridisaation ja immunokemian välillä on molekyyleissä, joita käytetään analyysimenettelyssä. ISH: ssa nukleiinihappokoettimia käytetään analyyseissä, kun taas IHC: ssä diagnostisiin määrityksiin käytetään monoklonaalisia ja polyklonaalisia vasta-aineita..

SISÄLLYS

1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mikä on in situ -hybridisaatio
3. Mikä on immunohistokemia
4. In situ -hybridisaation ja immunohistokemian väliset yhtäläisyydet
5. Vertailu rinnakkain - tilannehybridisaatio vs. immunohistokemia taulukkomuodossa
6. Yhteenveto

Mikä on in situ -hybridisaatio (ISH)?

In situ -hybridisaatio on nukleiinihappohybridisaatiotekniikka, joka suoritetaan suoraan kudoksen osalle tai osalle, koko kudoksessa tai soluissa. Tekniikka riippuu Watson Crick-komplementaarisen emäsparin teoriasta, mikä johtaa joko DNA-DNA-hybrideihin tai DNA-RNA-hybrideihin, jotka voivat havaita mutatoituneet geenit tai tunnistaa vaaditut kiinnostavat geenit. Yksijuosteisia DNA-sekvenssejä, kaksijuosteisia DNA-sekvenssejä, yksijuosteisia RNA-sekvenssejä tai synteettisiä oligonukleotidisekvenssejä käytetään koettimina hybridisaatiotekniikan aikana, ja nämä koettimet on merkitty radioaktiivisella fosforilla sen 5'-päässä sen tunnistamismenetelmiin autoradiografialla tai merkitty fluoresoivilla väriaineilla . Saatavilla on erityyppisiä ISH-tekniikoita käytetyn koettimen tyypin ja noudatetun visualisointitekniikan perusteella.

Kuva 01: Fluoresoiva tilan hybridisaatio

ISH: lla on monia sovelluksia, pääasiassa tartuntatautien molekyylidiagnostiikassa patogeenien esiintymisen tunnistamiseksi ja patogeenin varmistamiseksi molekyylidiagnostiikan avulla. Sitä käytetään myös kehitysbiologian, karyotyyppien määrittämisen ja fylogeneettisen analyysin sekä kromosomien fyysisen kartoituksen aloilla..

Mikä on immunohistokemia (IHC)?

IHC-tekniikassa tärkein analysoitu molekyyli on antigeeni. IHC: n aikana monoklonaalisia ja polyklonaalisia vasta-aineita käytetään antigeenien läsnäolon määrittämiseen infektioiden tai pahanlaatuisten solujen lisääntymistilanteissa. Tekniikka perustuu antigeenin ja vasta-aineen sitoutumiseen, ja tähän tekniikkaan käytetään entsyymileimoja; yksi tällainen sovellus on ELISA (entsyymisidottu immunosorbenttimääritys). Markerit voivat olla myös fluoresoivia leimattuja vasta-aineita tai radioleimattuja vasta-aineita.

Kuvio 02: immunohistokemia

IHC: tä käytetään laajasti syöpäsolujen havaitsemiseen. Diagnostiset toimenpiteet kohdistuvat kasvainsoluissa oleviin antigeeneihin kasvaimen tunnistamiseksi ja karakterisoimiseksi. Sama menettely sisältyy tartunta-aineiden diagnosointiin. Monoklonaalisia ja polyklonaalisia vasta-aineita käytetään myös erilaisten geenituotteiden analysointiin mahdollistamalla vasta-aine-antigeeni-sitoutumisreaktio halutun proteiinin ja annetun synteettisen vasta-aineen välillä..

Mitkä ovat in situ -hybridisaation ja immunohistokemian väliset yhtäläisyydet?

• ISH ja IHC ovat erittäin spesifisiä reaktioita.
• Molemmat tekniikat ovat erittäin tarkkoja.
• Molempia tekniikoita voidaan käyttää syövän ja tartuntatautien diagnostiikassa.
• Nämä tekniikat suoritetaan steriileissä in vitro -ympäristöissä.
• Molemmat ovat nopeita tekniikoita, jotka tarjoavat toistettavia tuloksia.
• ISH ja IHC käyttävät havaitsemismenetelmiä, kuten radiomerkintöjä ja fluoresenssitekniikoita.

Mikä on ero in situ -hybridisaation ja immunohistokemian välillä?

In situ -hybridisaatio vs. immunohistokemia
ISH on nukleiinihappohybridisaatiotekniikka, joka suoritetaan suoraan kudoksen osalle tai osalle tai koko kudokselle.	IHC on tekniikka, jossa monoklonaalisia ja polyklonaalisia vasta-aineita käytetään antigeenien, jotka ovat solupinnoille asetettuja erityisiä proteiinimarkkereita, esiintymisen määrittämiseen.
Analysoitujen biomolekyylien tyyppi
ISH analysoi nukleiinihappoja.	IHC analysoi proteiineja antigeenejä.
Biokemiallisen reaktion perusteet
DNA-DNA: n tai DNA-RNA: n välillä tapahtuu komplementaarista emäsparia tässä tekniikassa.	Antigeeni-vasta-ainevuorovaikutukset ovat mukana immunohistokemiassa.
Entsyymisidonnaiset detektiomenetelmät
Entsyymiliittymiä havaitsemismenetelmiä ei voida käyttää ISH: ssa.	Entsyymisidottuja havaitsemismenetelmiä voidaan käyttää IHC: ssä.

Yhteenveto - In situ -hybridisaatio vs. immunohistokemia

Molekyylidiagnostiikka on nopeaa ja varmentavaa menetelmää, jota voidaan käyttää tunnistamaan ei-tarttuva tauti, kuten syöpä tai tarttuva tauti, kuten HIV tai tuberkuloosi, soluissa olevien molekyylimarkkerien perusteella, jotka johtavat taudin ilmenemiseen. Molekyylimarkkereita voi olla läsnä ekspressoitujen proteiinien muodossa tai geneettisellä tasolla, johon perustuen erilaisia ​​uusia tekniikoita otetaan käyttöön tehokkuuden lisäämiseksi ja ovat vähemmän työläitä, vaikka näihin tekniikoihin liittyy kalliita kustannuksia. Siten ISH riippuu DNA-DNA tai DNA-RNA hybridi muodostumisesta, ja IHC riippuu spesifisistä reaktioista vasta-aineen ja antigeenin välillä. Tämä on ero in situ -hybridisaation välillä.

Lataa PDF-versio In situ -hybridisaatiosta vs. immunohistokemia

Voit ladata tämän artikkelin PDF-version ja käyttää sitä offline-tarkoituksiin lainaushuomautuksen mukaisesti. Lataa PDF-versio tästä. Eri olosuhteissa tapahtuvan hybridisaation ja immunohistokemian välillä.

Viitteet:

1. Duraiyan, Jeyapradha, et ai. "Immunohistokemian sovellukset." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, elokuu 2012, saatavana täältä. Saavutettu 24. elokuuta 2017.
2. ”In situ -hybridisaatio (ISH).” Kansallinen bioteknologiatietokeskus, Yhdysvaltain kansallinen lääketieteellinen kirjasto, saatavana täältä. Saavutettu 24. elokuuta 2017.

Kuvan kohteliaisuus:

1. ”KALAT (fluoresoiva in situ -hybridisaatio)”, kirjoittanut MrMatze - Oma työ (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta
2. “Immunohistochemicalstaining2”, kirjoittanut Imoen englanninkielisessä Wikipediassa (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta