Ero HPLC n ja HPTLC n välillä

Avainero - HPLC vs. HPTLC
 

Avainero HPLC: n ja HPTLC: n välillä on se HPLC mahdollistaa komponenttien kvantitatiivisen erottelun näytteessä, kun taas HPTLC ei salli komponenttien kvantitatiivista erottelua näytteessä.

Kromatografia on fysikaalinen erotusmenetelmä, jota käytetään seoksen komponenttien erottamiseen ja tunnistamiseen. Sekä HPLC että HPTLC ovat kromatografiset tekniikat. HPLC on korkean suorituskyvyn nestekromatografia. HPTLC on korkean suorituskyvyn ohutkerroskromatografia.

SISÄLLYS

1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mikä on HPLC
3. Mikä on HPTLC
4. Vertailu rinnakkain - HPLC vs. HPTLC taulukkomuodossa
5. Yhteenveto

Mikä on HPLC?

HPLC on korkean suorituskyvyn nestekromatografia. Se on analyyttinen tekniikka, jota käytetään seoksen komponenttien erottamiseen, tunnistamiseen ja kvantifiointiin. Tässä tekniikassa näyte liuotetaan sopivaan liuottimeen. Sitten näytteen sisältävä liuotin johdetaan pumpulla tietyllä paineella. Pumppu on täynnä kiinteää adsorbenttia. Sitten jotkut komponentit sitoutuvat voimakkaasti imukykyiseen materiaaliin, kun taas muut komponentit sitoutuvat löysästi. Tämän vuoksi komponenteilla on erilaiset virtausnopeudet pumpun läpi. Siksi komponentit voidaan erottaa helposti.

Kuva 01: HPLC-järjestelmä

Adsorptioaine, joka täyttää pumpun, tunnetaan nimellä paikallaan oleva vaihe. Liuotin liuenneen näytteen kanssa tunnetaan liikkuvana faasina. Tässä tekniikassa käytettyä pumppua kutsutaan sarakkeeksi. Pylväs on täytetty adsorboivalla materiaalilla, tavallisimmin silikahiukkasilla. Näiden hiukkasten koko voi vaihdella välillä 2-50 μm. Erotusprosessiin vaikuttavat liikkuvan vaiheen koostumus ja järjestelmän lämpötila. Kiinteän faasin ja näytteessä olevan komponentin väliset vuorovaikutukset voivat olla hydrofobisia vuorovaikutuksia, dipoli-dipoli-vuorovaikutuksia, ionista sitoutumista jne..

HPLC: n käyttöpaine on huomattavasti korkeampi kuin perinteisessä nestekromatografiassa. Se on noin 50-350 baaria. Nestekromatografian ja HPLC: n välinen ero on se, että nestekromatografiassa näyte putoaa pylvään läpi painovoiman alaisena, kun taas HPLC: ssä näyte paineistetaan pylvään läpi. Pylvään koko ja absorboivat hiukkaset ovat myös hyvin pieniä verrattuna perinteiseen nestekromatografiaan. HPLC-tekniikan antama resoluutio on kuitenkin parempi.

Mikä on HPTLC?

HPTLC on korkean suorituskyvyn ohutkerroskromatografia. Se on perinteisen TLC: n edistyksellinen ja automatisoitu muoto. Tämä tekniikka tarjoaa tehokkaan resoluution lyhyessä ajassa. Tässä analyysimenetelmässä näyte ja referenssi voidaan analysoida samanaikaisesti, mikä mahdollistaa näytteen vertaamisen referenssiin. Se antaa parantuneen analyyttisen tarkkuuden kuin muut kromatografiset tekniikat. Analyysiin kulunut aika on vähemmän. Tekniikka on edullinen tekniikka.

Kuvio 02: Elintarvikevärien analyysi HPTLC: tä käyttämällä

HPTLC-menetelmä on yksinkertainen prosessi, ja myös näytteen valmistusvaihe eliminoidaan (perinteisessä TLC: ssä näytteen valmistusvaihe sisältyy ennen erotusta. Tämä vaihe käsittää puhdistuksen ja rikastamisen). Liuotinta voidaan käyttää suoraan ilman esikäsittelyä, vaikka muut kromatografiset tekniikat vaativat esikäsittelyjä, kuten kaasunpoiston, suodatuksen jne..

HPTLC: ssä käytetty adsorbenttimateriaali on piidioksidi, jolla on erittäin pienet hiukkaskoot. Perinteisessä TLC: ssä piidioksidin hiukkaskoko on 5 - 20 um, kun taas HPTLC: ssä se on 4-8 μm. Näyte levitetään HPTLC-levylle applikaattorin avulla. Se antaa yhdenmukaisen ja turvallisen sovelluksen. Sitten levyt sijoitetaan kammioon, jossa on liikkuva faasi. Kammion tulisi olla kyllästetty liikkuvan faasin höyryllä. HPTLC-prosessin jälkeen muuttuneet täplät voidaan havaita. Kun havaitaan levyn täplät, HPTLC-tekniikka käyttää sopivaa UV-aluetta tai jodikammiota.

Mikä on ero HPLC: n ja HPTLC: n välillä?

HPLC vs. HPTLC
HPLC on korkean suorituskyvyn nestekromatografia.	HPTLC on korkean suorituskyvyn ohutkerroskromatografia.
Tekniikka
HPLC: ssä liikkuva faasi liuottimen kanssa johdetaan pylvään läpi, joka on täytetty paikallaan olevalla faasilla.	HPTLC: ssä näyte laikutetaan TLC-levylle ja asetetaan kammion sisään, joka sisältää liikkuvan faasin; sitten näytteen annetaan siirtyä ylöspäin levyä liikkuvan vaiheen mukana.
mittaus
HPLC: ssä komponenttien virtausnopeuksien eroja pylvään läpi käytetään erottamaan komponentit näytteessä.	HPTLC: ssä näytteen kunkin komponentin kuljettujen etäisyyksien eroja käytetään näytteen komponenttien erottamiseen.
Määrällinen erottelu
HPLC mahdollistaa komponenttien kvantitatiivisen erottelun näytteessä.	HPTLC ei salli näytteen komponenttien kvantitatiivista erottelua.

Yhteenveto - HPLC vs. HPTLC

HPLC ja HPTLC ovat kaksi kromatografista tekniikkaa. Keskeinen ero HPLC: n ja HPTLC: n välillä on se, että HPLC sallii näytteessä olevien komponenttien kvantitatiivisen erottelun, kun taas HPTLC ei salli näytteen komponenttien kvantitatiivista erottelua.

Viite:

1. ”Suorituskykyinen nestekromatografia.” Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10. huhtikuuta 2018, saatavana täältä.
2. ”HPTLC.” LinkedIn SlideShare, 30. toukokuuta 2011, saatavana täältä.

Kuvan kohteliaisuus:

1. “HPTLCplatetoMS” Kjaergaardin englanninkielinen Wikipedia - siirretty en.wikipediasta Commonsiin (Public Domain) Commons Wikimedian kautta
2. “Hplc” kirjoittanut PD Dr. rer. nat. Habil. Gertrud MorlockAssistentti (Privatdozentin) Hohenheimin yliopistoRuokakemian instituutti - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG-bibliografiapalvelu 103 (2009) Commons Wikimedia -sovelluksen kautta