Ero Gram-tahran ja haponkestävyyden välillä

Avainero - Gram Stain vs. happo nopeasti

Bakteerit ovat hyvin pieniä mikro-organismeja. Ne ovat läpinäkyviä ja niiden havaitseminen on vaikeaa elävissä ja värjäämättömissä olosuhteissa. Siten kehitetään erilaisia värjäysmenetelmiä bakteerien havaitsemisen helpottamiseksi. Värjäystekniikoita on kolme päätyyppiä: yksinkertainen värjäys, differentiaalinen värjäys ja rakennevärjäys. Erotusvärjäys on tekniikka, jossa bakteerien erilaistamiseen käytetään useampaa kuin yhtä tahraa. Gram- ja haponkestävä tahra tunnetaan yleisimmin differentiaalisina tahroina. Gram-värjäys on differentiaalinen värjäystekniikka, joka jakaa bakteerit kahteen ryhmään, jotka tunnetaan gram-positiivisina bakteereina ja gramnegatiivisina bakteereina. Haponkestävä tahra on differentiaalinen tahra, jota käytetään haponkestävien organismien, kuten Mycobacterium, tunnistamiseen hapottomista nopeista organismeista. Tämä on avainero gram-tahran ja Acid Fast -värjäyksen välillä.

SISÄLLYS

1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mikä on gram-tahra
3. Mikä on hapan nopeasti
4. Gram-tahran ja haponkestävyyden väliset yhtäläisyydet
5. Vertailu rinnakkain - Gram Stain vs. happea nopeasti taulukkomuodossa
6. Yhteenveto

Mikä on Gram Stain?

Gram-värjäys on tärkeä differentiaalinen värjäystekniikka, jota käytetään bakteerien tunnistamiseen mikrobiologiassa. Tanskalainen bakteriologi Hans Christian Gram otti tämän tekniikan käyttöön vuonna 1884. Gram-värjäys luokittelee bakteerit kahteen pääryhmään, nimeltään gram-positiiviset ja gram-negatiiviset, jotka ovat erittäin tärkeitä bakteerien luokittelussa ja tunnistamisessa. Mikrobiologit suorittavat gram-värjäyksen alkuvaiheena bakteerien karakterisoinnissa opintojensa aikana.

Bakteerit ryhmitellään niiden soluseinämän erojen perusteella. Gram-positiiviset bakteerit koostuvat paksusta peptidoglykaanikerroksesta niiden soluseinämässä, kun taas gram-negatiiviset bakteerit koostuvat ohuesta peptidoglykaanikerroksesta niiden soluseinämässä. Gramvärjäyksen tulos perustuu soluseinän peptidoglykaanikerroksen paksuuden eroon.

Viljavärjäys suoritetaan käyttämällä neljää eri reagenssia, nimittäin; ensisijainen tahra, peittoaine, värinpoistoaine ja vasta-tahra. Kristalliviolettia ja safraniinia käytetään pää- ja vastavärinä, vastaavasti kun grammaa jodia ja 95-prosenttista alkoholia käytetään vastaavasti peittävänä aineena ja värinpoistoaineena. Grammauksen perusvaiheet ovat seuraavat;

Bakteerivaaka valmistetaan puhtaalle lasille, kiinnitetään lämpöä ja jäähdytetään.
Haju tulvii kristallivioletilla 1 - 2 minuutin ajan.
Haju huuhdellaan hitaalla juoksevalla vesijohtovedellä ylimääräisten tahrojen poistamiseksi.
Grammaa jodia levitetään smeariin yhden minuutin ajan.
Haju huuhdellaan hitaalla juoksevalla vesijohtovedellä
Vaahto pestään 95-prosenttisella alkoholilla 2 - 5 sekuntia ja huuhdellaan hitaalla juoksevalla vesijohtovedellä.
Haju on värjätty safraniinilla 1 minuutin ajan
Vaahto huuhdellaan hitaalla juoksevalla vesijohtovedellä, kuivataan ja tarkkaillaan mikroskoopin alla.

Grammaisen lopussa gram-negatiiviset bakteerit havaitaan vaaleanpunaisena, kun taas gram-positiiviset bakteerit havaitaan purppuraisena.

Kuvio 01: gram-negatiiviset ja gram-positiiviset bakteerit

Grammaisen lopputuloksen päättää peptidoglykaanikerroksen paksuus niiden soluseinämässä. Värjäysvaiheen aikana primaarinen tahra ja peittäjä poistetaan helposti gram-negatiivisista bakteereista ja muuttuvat värittömiksi, koska niillä on ohut peptidoglykaanikerros. Ensisijainen tahra säilyy gram-positiivisissa bakteereissa, koska niillä on paksu peptidoglykaanikerros. Vastavärjäys ei ole tehokas gram-positiivisille bakteereille primaarisen värjäytymisen vuoksi. Siten gramman positiiviset bakteerit näkyvät primaarissa värivärissä, toisin sanoen violetissa värissä. Vastavärjä tahraa gram-negatiiviset bakteerit, ja ne ovat näkyvissä valintavärinä, joka on safraniinivärinen. Siksi bakteereja on helppo luokitella kahteen ryhmään gramman värjäyksen perusteella ja se on arvokas bakteerien erilaistumisessa ja tunnistamisessa.

Mikä on hapan nopeasti?

Haponkestävyys on tiettyjen bakteerien fysikaalinen ominaisuus, erityisesti niiden vastustuskyky happojen värjäytymiseen värjäysmenettelyjen aikana. Värjättyään nämä organismit kestävät laimennettua happo- ja / tai etanolipohjaisia värinpoistomenetelmiä, jotka ovat yleisiä monissa värjäysmenettelyissä. Niinpä nimi 'hapan nopeasti' on annettu näille organismeille. Tämä ominaisuus osoitetaan johtuen siitä, että niiden soluseinämissä on korkea vahamaisen materiaalin (mykolihappojen) määrä. Tämä testi on kriittinen Mycobacterium tuberculosis.

Kuvio 2: Hapan nopeasti mykobakteerit

Tämän haponkestävän värjäyksen kehitti Paul Ehrlich vuonna 1882. Ziehl-Neelsen muutti Ehrlichin haponkestävää tekniikkaa, ja sitä käytetään nyt useammin. Hapon nopeavärjäysmenetelmä sisältää kolme eri reagenssia. Karbolifuschinia käytetään pääasiallisena tahrana. Hapan alkoholia käytetään värinpoistoaineena. Metyleenisinistä käytetään vastavärinä. Värjäys suoritetaan seuraavasti.

Ensisijainen tahra (karbolifuksiini) levitetään kiinteälle näytteelle objektilasilla (kaikki solut värjätään punaisella).
Levyä kuumennetaan höyryttämällä 5 minuutin ajan, mikä johtaa tahrat soluihin kunnolla.
Sitten lisätään värittövä liuos (Tämä poistaa punaisen väriaineen kaikista soluista paitsi haponkestävät bakteerit).
Metyleenisinistä lisätään vastavärinä (se värjentää kaikki värjätyt bakteerisolut).
Hapan nopeasti bakteerit pysyvät punaisina, kun taas happamat nopeasti bakteerit värjäävät sinisenä.

Mitkä ovat samankaltaisuudet gram-tahran ja haponkestävyyden välillä?

Gram-tahra ja happo nopeasti ovat kaksi erotusvärjäystekniikkaa.
Molemmat tekniikat luokittelevat bakteerit kahteen ryhmään.
Molemmat tekniikat käyttävät kahta tahraa ja yhden värjäytymistä.

Mikä ero on gram-tahran ja haponkestävyyden välillä??

Gram Stain vs. happo nopeasti
Gram -värjäys on differentiaalinen värjäystekniikka, joka erottaa bakteerit kahteen ryhmään: Gram-positiiviset ja Gram-negatiiviset bakteerit.	Acid Fast-tahra on differentiaalinen tahra, jota käytetään haponkestävien organismien tunnistamiseen ei-happavista nopeista organismeista.
Ensisijainen tahra
Kristalli violetti on yleisimmin käytetty ensisijainen tahra grammavärjäyksessä.	Karbolifuksiini on ensisijainen tahra, jota käytetään hapanta nopeasti.
Värinpoistoaine
Väkevöivänä aineena gramman värjäyksessä käytetään 95-prosenttista alkoholia.	Hapan alkoholia käytetään värinpoistoaineena nopeasti hapan.
Counter Stain
Gram-tahra käyttää vasta-aineena safraniinia.	Hapon nopea tahra käyttää metyleenisinistä vastavärinä.
havainto
Gramnegatiivisia bakteereja havaitaan valintavärissä ja gram-positiivisia bakteereja havaitaan purppuravärisinä.	Happamia bakteereja havaitaan punaisella värillä ja happamia nopeita bakteereja sinisellä värillä.

Yhteenveto - Gram Stain vs. Acid Fast

Mikro-organismien visualisointi elävässä tilassa on vaikeaa. Siksi biologisia tahroja ja värjäysmenetelmiä käytetään laajasti niiden ominaisuuksien tutkimiseen. Differentiaalinen värjäys on eräs tyyppinen värjäystekniikka, jota käytetään bakteerien erottamiseen. Gram-tahra ja nopeasti hapan värjäys ovat kaksi erilaista värjäystekniikkaa. Gram-värjäys erottaa gram-negatiiviset bakteerit ja gram-positiiviset bakteerit niiden soluseinien paksuuden perusteella. Hapolla nopeasti tapahtuva värjäys erottaa hapannopeat bakteerit eihaponkestävistä bakteereista soluseinämän mykolihappopitoisuuden perusteella. Tämä on ero hapan nopeasti ja gram-tahraa.

Lataa PDF-versio Gram Stain vs. Acid Fast -sovelluksesta

Voit ladata tämän artikkelin PDF-version ja käyttää sitä offline-tarkoituksiin lainaushuomautuksen mukaisesti. Lataa PDF-versio tästä. Ero grammatilauksen ja haponkestävyyden välillä.

Viitteet:

1. Aryal, Sagar. "Haponkestävä tahra - periaate, menetelmä, tulkinta ja esimerkit." Online-mikrobiologiahuomautuksia. N.p., 8. toukokuuta 2017. Web. Saatavilla täältä. 20. heinäkuuta 2017.
2. Differentiaaliset tahrat bakteerien tunnistamiseksi: gram, happamaton ja endospoori. N.p., n.d. Web. Saatavilla täältä. 20. heinäkuuta 2017.

Kuvan kohteliaisuus:

1. Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) ”imusolmuke - epätyypillinen mykobakteeritartunta (MAI) - AFB-tahra” Flickrin kautta
2. ”Gram stain 01” Y tambe - Y tamben tiedosto (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta

Tiede ja luonto