avainero geenin monistuksen ja geenin kloonauksen välillä on, että geenin monistaminen on prosessi, jolla tehdään useita kopioita kiinnostavasta geenistä in vitro polymeraasiketjureaktiolla. Mutta geenikloonaus on prosessi, jolla valmistetaan useita kopioita kiinnostavasta geenistä in vivo tekemällä rekombinanttiplasmidi ja muuntamalla se isäntäbakteereksi.
Geeni on spesifinen DNA-fragmentti, joka koodaa proteiinia. Organismin hallussa on tuhansia geenejä. Lisäksi on mahdollista moninkertaistaa tärkeiden geenien DNA-sekvenssit käyttämällä molekyylibiologisia tekniikoita. Geenien monistaminen ja geenien kloonaus ovat kaksi tällaista menettelytapaa. Molemmat menetelmät tuottavat useita kopioita kiinnostavasta geenistä. Geenien monistamisen ja geenien kloonauksen välillä on kuitenkin ero niiden metodologian suhteen.
1. Yleiskatsaus ja keskeiset erot
2. Mikä on geenivahvistus
3. Mikä on geenikloonaus
4. Geenien monistumisen ja geenien kloonauksen väliset yhtäläisyydet
5. Vertailu rinnakkain - geenien monistus vs. geenien kloonaaminen taulukkomuodossa
6. Yhteenveto
Geenien monistaminen on prosessi, jolla valmistetaan kopioita tietystä geenistä käyttämällä polymeraasiketjureaktiota. Geenin monistamiseksi kyseisen organismin DNA tulisi uuttaa käyttämällä asianmukaista DNA: n uuttoprotokollaa. Sitten uutettu kaksijuosteinen DNA tulisi denaturoida, jotta saadaan erotetut yksittäiset juosteet. Seuraava vaihe sisältää PCR-reaktion käytön kopioiden tekemiseksi mielenkiinnon kohteena olevasta geenistä. Lisäksi PCR-seos sisältää vaaditut alukkeet, nukleotidit, DNA-polymeraasientsyymi, templaatti-DNA ja muut aineosat. Kiinalaisen ohjelman lopussa tapahtuu mielenkiinnon kohteena olevan geenin monistus.
Kuva 01: geenin monistus
Lisäksi geenien monistaminen on alkuvaihe tietyn sekvenssin havaitsemiseksi, organismin tunnistamiseksi, tautien diagnosoimiseksi ja geenikirjastojen tekemiseksi jne..
Geenikloonaus on menetelmä geenitekniikassa geenikirjastojen valmistamiseksi tai monien kopioiden tekemiseksi kiinnostuksen kohteena olevasta geenistä. Tämä prosessi sisältää rekombinanttiplasmidin valmistamisen ja rekombinanttiplasmidin transformoinnin isäntäsoluksi, erityisesti bakteerisoluksi. Klooni on identtinen kopio alkuperäisestä organismista tai molekyylistä. Geenikloonaus voi tehdä tuhansia geeniklooneja.
Kuvio 02: geenikloonaus
Kun mielenkiinnon kohteena oleva geeni on tunnistettu, se voidaan erottaa tietyn organismin genomista rajoittamalla sitä spesifisillä restriktioentsyymeillä. Sitten käyttämällä samaa restriktioentsyymiä, plasmidit (vektorit) tulisi avata geenifragmentin lisäämiseksi. Sitten rekombinanttiplasmidi transformoidaan isäntäbakteereiksi käyttämällä erilaisia menetelmiä, kuten elektroporaatiota. Jotkut rekombinanttiplasmideista tulevat isäntäbakteerisoluihin. Muunnetut bakteerit voidaan valita antibiootin avulla, eristää ja viljellä tuoreissa elatusaineissa. Siten tämä tekniikka auttaa saamaan miljoonia geeniklooneja.
Geenien monistaminen on prosessi, joka tekee kopioita tietystä geenistä käyttämällä in vitro menetelmä nimeltään PCR. Toisaalta geenikloonaus on prosessi, joka tekee kopioita tietystä geenistä käyttämällä in vivo menetelmä rakentamalla rekombinanttivektoreita ja lisäämällä ne elävään organismiin. Joten, tämä on avainero geenien monistumisen ja geenien kloonauksen välillä. Lisäksi geenin monistaminen vie vain muutaman tunnin, kun taas geenin kloonaaminen kestää useita päiviä. Siksi voimmekin pitää tätä erona geenien monistuksen ja geenien kloonauksen välillä. Lisäksi geenin monistusprosessi osoittaa vähemmän virheitä, kun taas geenin kloonausprosessi osoittaa enemmän virheitä.
Seuraava infografia esittää yhteenvedon geenien monistumisen ja geenien kloonauksen välisestä erotuksesta.
Geenin monistaminen on prosessi, jolla valmistetaan kopioita halutusta geenistä käyttämällä polymeraasiketjureaktiota in vitro -olosuhteissa, kun taas geenikloonaus on prosessi, jolla valmistetaan kopioita kiinnostavasta geenistä käyttämällä rekombinantti-DNA-molekyyliä ja elävää organismia / isäntäbakteeria. Siten tämä on perusedellytys geenien monistumisen ja geenien kloonauksen välillä.
1. ”Molekyylikloonaus”. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 2. elokuuta 2019, saatavana täältä.
2. ”Geenivahvistus.” Geenien monistus - yleiskatsaus | ScienceDirect-aiheet, saatavana täältä.
1. ”PCR” - Madprime - Oma työ (CC BY-SA 3.0) Commons Wikimedian kautta
2. “Molecular Cloning Steps” - kirjoittanut Alexpicardal97 - Oma työ (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedian kautta