DPBS vs. PBS
PBS tai fosfaattipuskuroitu suolaliuos ja Dulbeccon fosfaattipuskuroitu suolaliuos (DPBS) ovat puskuroituja suolaliuok- sia, joita käytetään biologisissa tutkimuksissa. PBS: ää ja DPBS: ää käytetään soluihin liittyvissä tutkimuksissa. Liuoksen ionipitoisuus ja osmolaarisuus ovat isotonisia, ts. Se on yhteensopiva ihmisen kehon kanssa. Puskuri helpottaa vakaan pH: n aikaansaamista ja säilyttämistä 7,2 - 7,6.
PBS: n ja DPBS: n välillä ei ole merkittävää eroa. Molemmat niistä sisältävät natriumfosfaattia, natriumkloridia ja tarvittaessa kaliumfosfaattia ja kaliumkloridia. Muut valmisteet, kuten DPBS, voivat sisältää kalsiumia ja magnesiumia tai eivät. PBS: llä ja DPBS: llä on lukuisia sovelluksia, koska ne eivät ole haitallisia soluille. Sekä PBS: ää että DPBS: ää voidaan käyttää solujen saastuttamien instrumenttien tai astioiden huuhtelemiseen. Lisäksi molempia voidaan käyttää laimentamaan aineita. Laimennusaineiden, kuten proteiinien, sisällä olevat vesimolekyylit keskeytetään ja kuivataan. Aineeseen yhdistyvä vesi estää ainetta konformaatiomuutoksilta, kuten denaturoitumiselta. Kalsium- ja magnesiumliuokset voivat hillitä trypsiinin aktiivisuutta. Ellipsometriassa proteiinin adsorptio voidaan mitata ottamalla emässpektri käyttämällä PBS: ää.
Fosfaattipuskuroitua suolaliuosta, jossa on lisäaineita, kuten EDTA, voidaan käyttää niputettujen solujen erottamiseen. Saostuminen muodostuu, kun sinkki, kaksiarvoinen metalli, lisätään PBS: ään, minkä vuoksi sitä ei voida lisätä irrotettuihin soluihin. Good-puskuria käytetään sinkin sijasta tällaisissa tilanteissa.
Fosfaattipuskuroitu suolaliuos ja Dulbeccon fosfaattipuskuroitu suolaliuos valmistetaan monilla tavoilla. Yksi tapa valmistaa se on liuottamalla 800 g. natriumkloridi, 20 g. kaliumkloridi, 2 vesimolekyyliä, 24 g. kaliumfosfaatti ja 144 g. natriumfosfaatti 8 litrassa tislattua vettä. Lopputuloksena on 10 litraa 10-kertaista PBS: ää. Mittaa PBS: n pH suoraan pH-mittarilla valmistettaessa puskuroituja liuoksia. Liuoksen pH voidaan säätää käyttämällä natriumhydroksidia tai suolahappoa. Fosfaattipuskuroitu suolaliuos laimennusaineena valmistetaan loppukonsentraatiolla 10 mM fosfaattia, 137 mM natriumkloridia, 2,7 mM kaliumkloridia ja pH: lla 7,4. Fritschillä, Sambrookilla ja Maniatisilla on oma tapa valmistaa puskuriliuoksia kirjassaan, jonka otsikko on ”Molecular Cloning”. Vastaavasti litran 1x PBS: n suhteen aloitetaan valmistus 800 ml: lla. tislattua vettä. Sisällytä 8 g. natriumkloridia sekä 0,2 g. kaliumkloridia. 1,44 g. Sitten lisätään natriumfosfaattia, jota seuraa 0,24 g. kaliumfosfaattia. Laita suolahappoon pH: n säätämiseksi arvoon 7,4. Yhden litran PBS: n tuottamiseksi lisää lisää tislattua vettä, kunnes taso on 1 litra. Tyhjennä saatu liuos osaan ja steriloi liuos autoklaavin avulla. Säädä autoklaavi 121 ° C: seen ja autoklaavi 20 minuutin ajan nestesyklissä. Sen jälkeen säilytä liuos huoneenlämpötilassa.
Vaikka fosfaattipuskuroitu suolaliuos ja Dulbeccon fosfaattipuskuroitu suolaliuos valmistetaan monin tavoin, sisältö on silti sama. Siksi, riippumatta siitä, miten sitä valmistellaan, tulokset ja käytöt ovat edelleen samat.
Yhteenveto:
1.PBS tai fosfaattipuskuroitu suolaliuos ja Dulbeccon fosfaattipuskuroitu suolaliuos (DPBS) ovat puskuroituja suolaliuoksia, joita käytetään biologisissa tutkimuksissa.
2.Liuoksen ionipitoisuus ja osmolaarisuus ovat isotonisia, ts. Se on yhteensopiva ihmisen kehon kanssa. Puskuri helpottaa vakaan pH: n aikaansaamista ja säilyttämistä 7,2 - 7,6.
3.PBS: n ja DPBS: n välillä ei ole merkittävää eroa. Molemmat niistä sisältävät natriumfosfaattia, natriumkloridia ja tarvittaessa kaliumfosfaattia ja kaliumkloridia. Muut valmisteet, kuten DPBS, voivat sisältää kalsiumia ja magnesiumia tai eivät.
4.Mutta PBS: ää ja DPBS: ää voidaan käyttää solujen saastuttamien instrumenttien tai astioiden huuhteluun. Lisäksi molempia voidaan käyttää laimentamaan aineita. Laimennusaineiden, kuten proteiinien, sisällä olevat vesimolekyylit keskeytetään ja kuivataan. Aineeseen yhdistyvä vesi estää ainetta konformaatiomuutoksilta, kuten denaturoitumiselta. Kalsium- ja magnesiumliuokset voivat hillitä trypsiinin aktiivisuutta. Ellipsometriassa proteiinin adsorptio voidaan mitata ottamalla emässpektri käyttämällä PBS: ää.
5.Fosfaattipuskuroitua suolaliuosta lisäaineilla, kuten EDTA, voidaan käyttää niputettujen solujen erottamiseen. Saostuminen muodostuu, kun sinkki, kaksiarvoinen metalli, lisätään PBS: ään, minkä vuoksi sitä ei voida lisätä irrotettuihin soluihin. Good-puskuria käytetään sinkin sijasta tällaisissa tilanteissa.
6.PBS ja DPBS valmistetaan monin tavoin. Vaikka fosfaattipuskuroitu suolaliuos ja Dulbeccon fosfaattipuskuroitu suolaliuos valmistetaan monin tavoin, sisältö on silti sama. Siksi, riippumatta siitä, miten sitä valmistellaan, tulokset ja käytöt ovat edelleen samat.